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GUS染色液的染色原理

閱讀：3243 發(fā)布時(shí)間：2022-7-29
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　　GUS(β-Galactosidase)基因是存在于E.coli等一些細(xì)菌基因組內(nèi)的編碼β-葡萄糖苷酸酶的一種水解酶，該基因常作為融合標(biāo)記用于植物轉(zhuǎn)基因分析和調(diào)控研究中。GUS染色的實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖菍?duì)植物樣本進(jìn)行染色，因?yàn)榻^大多數(shù)植物細(xì)胞內(nèi)不存在內(nèi)源GUS活性，因此GUS基因廣泛用作轉(zhuǎn)基因植物的報(bào)告基因。

　　GUS染色液是β-葡萄糖苷酶基因染色試劑盒(β-Galactosidase Reporter Gene Staining Kit)的簡稱。GUS染色液染色原理是適宜的反應(yīng)條件下，β-葡萄糖苷酶(GUS)可將X-Gluc水解成藍(lán)色物質(zhì)，該物質(zhì)不溶解于轉(zhuǎn)基因的細(xì)胞核組織中的靛藍(lán)物質(zhì)，具有GUS活性的部位或位點(diǎn)呈現(xiàn)藍(lán)色或藍(lán)色斑點(diǎn)，可用肉眼或顯微鏡觀察到。GUS染色液可用于生物化學(xué)活性分析、免疫分析以及組織和細(xì)胞的組織化學(xué)染色，多用于轉(zhuǎn)基因植物的GUS基因表達(dá)分析。該試劑僅用于科研領(lǐng)域，不適用于臨床診斷或其他用途。

　　GUS染色液使用注意事項(xiàng)：

　　用于染色的植物材料的制備方法要因涉及的特定組織和器官的不同而異。例如，擬南芥的根、花和葉片以及煙草幼苗的根就可以不作任何預(yù)處理而直接染色。但是像煙草和馬鈴薯這些植物的莖和葉就必須在染色前切成薄片(1-3mm)。當(dāng)操作大的組織和樣品時(shí)，可以選用真空滲入法來幫助底物和酶滲入細(xì)胞。

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