目錄:北京索萊寶科技有限公司>>分子生物學(xué)>>DNA電泳>> G7140DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料
貨號 ：G7140
規(guī)格：0.5ml (10000×)
保存：常溫運(yùn)輸，4℃保存，有效期一年。
注意 ：本產(chǎn)品屬于微量核酸檢測試劑，使用時請按照說明書操作。
產(chǎn)品簡介 ：
目前常見的替代 EB 的核酸染料 SYBR Green I （屬于花氰類染料） 雖然毒性比 EB 低、 靈敏度比 EB 高，但由于其化學(xué)穩(wěn)定性差；此外，SYBR Green I 在電泳過程中能在 DNA 分子間移位，很容易使 DNA 條帶模糊和扭曲，電泳清晰度和分辨率下降。所以在實際應(yīng)用中依然不能有效替代 EB。本產(chǎn)品是同時具有 EB 穩(wěn)定性和 SYBR Green I 低毒性的新性核酸染料，其特點(diǎn)如下：
1. 低毒。其主要成分未發(fā)現(xiàn)對人體有致癌性、未被列入有毒有害品，有利于保護(hù)使用者的健康和保護(hù)日益惡化的環(huán)境。
2. 靈敏。檢測靈敏度跟 EB 相當(dāng)，能滿足常規(guī)核酸電泳實驗要求。
3. 穩(wěn)定。對光、水和熱的穩(wěn)定性跟 EB 相當(dāng)，可加入瓊脂糖凝膠中反復(fù)熔化。
4. 無分子間位移現(xiàn)象。不會出現(xiàn) SYBR 染料常見的條帶模糊和扭曲現(xiàn)象。
5. 使用方法多樣。既可以加入熔化的膠中，也可以電泳后染色，還可用于 PAGE。
6. 跟各種常用的核酸電泳緩沖液（如 SuperBuffer-2、TBE、TAE）兼容，但在 SuperBuffer-2 和 TBE 中背景低。
7. 觀察時不需要任何額外的儀器設(shè)備或 UV 光源，可以使用現(xiàn)成的觀察 EB 的 300nm UV。
8. 可用于 RNA 染色(也呈綠色)。
9. DNA 或 RNA 濃度較高時還可以直接在日光下觀察 （需要將膠放在黑色背景下） 。 由于避免了 UV 對 DNA的傷害，尤其適用于膠回收實驗。
使用方法:
電泳中染色：
本方法是將 DNAGREEN 直接加入溶化的凝膠中使用，只適用于瓊脂糖凝膠電泳，不適用于 PAGE。
1. 將 DNAGREEN 直接加入到融化的瓊脂糖凝膠中， 每 100mL 凝膠加 310 uL DNAGREEN， 混合均勻后倒膠。瓊脂糖凝膠中不能含任何其他染料（如 EB 和 SYBR Green I，否則會相互干擾） 。在 100mL 瓊脂糖凝膠中加入 DNAGREEN 的量不要超過 10 uL，否則背景增強(qiáng)。注意：一定要保證瓊脂糖*熔化，尤其是在*次熔化膠的時候，否則未熔化的小顆粒將產(chǎn)生跟染料相同的熒光。
2. 將 DNA 樣品與 DNA 上樣液按比例混合后上樣。注意：一定要使用不含 SDS 等去污劑的上樣液，否則SDS 會跟染料結(jié)合，極大地降低靈敏度。
3. 上樣后電泳，電泳參數(shù)同常規(guī)的電泳。
4. 電泳結(jié)束后在 300 nm 左右 的 UV 下觀察。
注意：不要使用波長為 260 nm 或 360 nm 的 UV，否則檢測靈敏度會降低。如果 DNA 或 RNA 濃度較高，還可以直接在日光下直接觀察（需要將膠放在黑色背景下） ，
避免 UV 對 DNA 的傷害，尤其適用于膠回收實驗。
5. 用配置了 520-550 nm 濾光片（一般呈黃色或深黃色）的相機(jī)拍照。注意：不要使用與 EB 兼容的紅色濾光片（它能阻擋 520-550 nm 的光） 。如果能再加上能濾去 UV 的濾光片，效果會更好。
6. 后續(xù) Southern、轉(zhuǎn)膜或 DNA 膠回收實驗按常規(guī)操作進(jìn)行。
電泳后染色：
本方法是在電泳后對 DNA 進(jìn)行染色，適用于瓊脂糖凝膠電泳和 PAGE。但該方法需要單獨(dú)的染色處理，染料用量較大，不推薦用于瓊脂糖凝膠的染色。
1. 按照常規(guī)方法進(jìn)行電泳。
2. 用去離子水將 DNAGREEN 稀釋 500 倍后（100 mL 水需要加 0.2 mL DNAGREEN） ，將凝膠放入，室溫下?lián)u晃染色 30 分鐘（對瓊脂糖凝膠）或 15 分鐘（對 PAGE） 。
3. 用水脫色 10-30 分鐘，具體時間需根據(jù)背景強(qiáng)弱決定。
注意：電泳后染色液可以反復(fù)使用次數(shù)。
疑難解答:
Q：本產(chǎn)品可否用于 RNA 染色？
A： 可以，不論 RNA 是在甲醛變性膠中電泳，還是在普通的 SuperBuffer-2、TBE 或 TAE 膠中電泳，RNA染色后在 300nm 下都跟 DNA 一樣呈綠色，
Q：本產(chǎn)品是否可以加入上樣液中進(jìn)行染色？
A：不行，本產(chǎn)品只能直接加入凝膠中進(jìn)行染色或電泳后再染色。
Q：為何前端（靠近正極）的 DNA 條帶很淡或根本看不見？
A：跟 EB 一樣，電泳時 DNAGREEN 朝負(fù)極方向移動，當(dāng)前端的 DNA（小片段）進(jìn)入沒有 DNAGREEN的區(qū)域時，已經(jīng)結(jié)合的染料分子會逐漸從 DNA 分子上脫落，所以條帶會變淡或根本看不見。解決辦法之一是縮短電泳時間或電泳后再染色；之二是在每 100 mL 電泳緩沖液中補(bǔ)加 3-5uL 染料。
Q：本產(chǎn)品在哪種緩沖液中效果好？
A：DNAGREEN 染料在不同緩沖液中背景熒光強(qiáng)度不同，從弱到強(qiáng)的順序是：SuperBuffer-2、TBE、TAE。
在背景較強(qiáng)的緩沖液體中，可以適當(dāng)降低染料的用量，比如 100mL 膠中加 3-5 uL。濃度需要稍做摸索。
Q：用 SYBR 染色的 DNA 在電泳時為何容易發(fā)生條帶模糊和扭曲現(xiàn)象？
A：SYBR 染料一般與 DNA 的小溝結(jié)合，但在常規(guī)電泳條件下該結(jié)合并不牢固，染料分子可以在標(biāo)記的和未
標(biāo)記的 DNA 分子之間轉(zhuǎn)移，使 DNA 分子的泳動速度時快（無染料結(jié)合時）時慢（有染料結(jié)合時） ，發(fā)生條帶模糊和扭曲現(xiàn)象。嵌入型染料（如 EB 和本產(chǎn)品）與 DNA 結(jié)合牢固，則無此現(xiàn)象。
相關(guān)產(chǎn)品 ：
T1050 5×TBE 緩沖液
T1060 50×TAE 緩沖液
E1020 EB 溶液 (10mg/ml)
A1020 40% 丙烯酰胺（ 19:1 ）
D1010 6×DNA Lodding Buffer
M1060 D2000 DNA Ladder
PC1120 2×Taq PCR MasterMix ( 含染料）
DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料訂購說明：
1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預(yù)訂，海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。
4、每日訂單截止時間為16點(diǎn)整，部分城市可到17點(diǎn)整，因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。
DNA電泳試劑 DNAGREEN 核酸染料運(yùn)輸說明：
1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝干冰運(yùn)輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中加裝索萊寶冰袋運(yùn)輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運(yùn)輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。
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