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| CAS | 詳詢 | 純度 | 詳詢 |
|---|---|---|---|
| 分子量 | 詳詢 | 分子式 | 詳詢 |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 100T/96S |
| 貨號 | BC4395 | 應用領域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,綜合 |
| 主要用途 | D-木糖含量檢測 |
D-木糖含量檢測試劑盒說明書
微量法
貨號：BC4395
規(guī)格：100T/96S
產(chǎn)品組成：使用前請認真核對試劑體積與瓶內(nèi)體積是否一致，有疑問請及時聯(lián)系索萊寶工作人員。
試劑名稱 | 規(guī)格 | 保存條件 |
提取液 | 液體55 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
試劑一A | 粉劑×4瓶 | 常溫保存 |
試劑一B | 液體40 mL×1瓶 | 2-8℃保存 |
標準品 | 粉劑×1支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 試劑一的配制：臨用前取一瓶試劑一A加入10mL試劑一B，溶解后備用，2-8℃保存1周，若試劑變黃色則已經(jīng)變質(zhì)，不能繼續(xù)使用。
2、 標準品：10mg木糖。臨用前加入1 mL蒸餾水配制成10mg/mL木糖標準溶液備用，2-8℃保存4周。
產(chǎn)品說明：
木糖是一種戊糖。天然D-木糖是以多糖的形態(tài)存在于植物中。木糖可以活化人體腸道內(nèi)的雙岐桿菌并促其生長，雙歧桿菌是益菌，該菌越多越有益人體健康，食用木糖能改善人體的微生物環(huán)境，提高機體的免疫能力；同時木糖在小腸上段吸收后不參與體內(nèi)的代謝，經(jīng)腎臟排出。因此，D-木糖的吸收一直作為小腸吸收不良的重要功能指標。
D-木糖在強酸條件下水解產(chǎn)生糠醛，糠醛可與間苯*反應生成粉紅色化合物，在554 nm處有特殊吸收峰，據(jù)此可由吸光值計算出樣本中木糖的含量。
低檢出限：0.0007 mg/mL
線性范圍：0.0078-0.9 mg/mL
注意：實驗之前建議選擇2-3個預期差異大的樣本做預實驗。如果樣本吸光值不在測量范圍內(nèi)建議稀釋或者增加樣本量進行檢測。
需自備的儀器和用品：
可見分光光度計/酶標儀、臺式離心機、水浴鍋、鼓風烘箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿器、30-50目篩、EP管、冰和蒸餾水。
一、樣本處理（可適當調(diào)整待測樣本量，具體比例可以參考文獻）
1、植物樣本：將供試的植物樣本在65℃的鼓風烘箱中烘干，研磨成粉狀，過30-50目篩。按質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）1 : 50~100比例（建議稱取10mg烘干樣本，加入0.5 mL提取液），渦旋混勻，在100℃水浴鍋中準確水解2 h，然后10000 rpm，室溫離心15 min，棄沉淀，取上清液待測。
2、組織樣本：按質(zhì)量（g）：提取液體積（mL）1 : 5~10比例（建議稱取0.05g樣本，加入0.5 mL提取液），研磨勻漿后，在100℃水浴鍋中準確水解2 h，然后于10000 rpm，室溫離心15 min，棄沉淀，取上清液待測。
3、血清（漿）等液體樣本：直接測定。
1、 分光光度計/酶標儀預熱30 min以上，調(diào)節(jié)波長至554 nm，分光光度計用蒸餾水調(diào)零。
2、 標準液的稀釋：將標準品用蒸餾水稀釋至0.8、0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625mg/mL的標準溶液備用。
3、 標準液稀釋可參考下表：
序號 | 稀釋前濃度（mg/mL） | 標準液體積（µL） | 蒸餾水體積（µL） | 稀釋后濃度（mg/mL） |
1 | 10 | 100 | 900 | 1 |
2 | 1 | 160 | 40 | 0.8 |
3 | 1 | 200 | 200 | 0.5 |
4 | 0.5 | 200 | 200 | 0.25 |
5 | 0.25 | 200 | 200 | 0.125 |
6 | 0.125 | 200 | 200 | 0.0625 |
7 | 0.0625 | 200 | 200 | 0.03125 |
8 | 0.03125 | 200 | 200 | 0.015625 |
實驗中每個標準管需50µL標準溶液。
4、 操作表（在0.6 mL EP管中操作）：
試劑名稱（μL） | 測定管 | 標準管 | 空白管 |
樣本 | 50 | - | - |
標準溶液 | - | 50 | - |
蒸餾水 | - | - | 50 |
試劑一 | 250 | 250 | 250 |
渦旋混勻，準確沸水浴8min（EP管蓋緊并用封口膜密封，避免水分散失影響體系），冰浴冷卻至常溫，測定554nm下的吸光度A，分別記為A測定管、A標準管、A空白管，計算ΔA標準=A標準管-A空白管，ΔA測定=A測定管-A空白管。標準曲線和空白管只需測1-2次。 | |||
1、標準曲線的繪制：
根據(jù)標準管的濃度（x，mg/mL）和吸光度ΔA標準（y，ΔA標準），建立標準曲線。根據(jù)標準曲線，將ΔA測定（y，ΔA測定）帶入公式計算樣本濃度（x，mg/mL）。
2、D-木糖含量的計算：
（1）植物中木糖含量（mg/g）=x×V提取÷W1=0.5x÷W1
（2）組織中木糖含量（mg/g）=x×V提取÷W2=0.5x÷W2
（3）血清（漿）木糖含量（mg/mL）= x×V樣÷V樣=x
V樣：加入樣本體積，0.05 mL；V提?。杭尤胩崛∫旱捏w積，0.5 mL；W1：植物樣本的質(zhì)量，g；W2：組織樣本的質(zhì)量，g。
注意事項：
1、 如果測定吸光值超過線性范圍吸光值，可以增加樣本量或者稀釋樣本后再進行測定。
2、 試劑一B因有強烈刺激性氣味，過多吸入對人體有害，故建議在通風櫥中進行操作。
1、 稱取0.05g衛(wèi)矛莖加入0.5mL提取液進行樣本處理，取上清后稀釋2倍按照測定步驟操作，96孔板測得并計算ΔA測定=A測定管-A空白管=0.345-0.045=0.3，帶入標準曲線y=1.5448x-0.0132，計算x=0.203，按照公式計算得：
植物中木糖含量（mg/g）=x×V提取÷W1×2（稀釋倍數(shù)）=0.203×0.5÷0.05×2=4.06 mg/g。
相關系列產(chǎn)品：
BC2690/BC2695 葡萄糖脫氫酶（GCDH）活性檢測試劑盒
BC4290/BC4295 N-乙酰基-β-葡萄糖苷酶（NAG）活性檢測試劑盒
D-木糖含量檢測試劑盒 微量法 D-木糖含量檢測試劑盒 微量法
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