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糖異生系列 丙酮酸羧化酶（PC）測試盒
貨號：BC0730
規(guī)格：100管/96樣
測試方法：微量法

測定意義：
    丙酮酸羧化酶(pyruvate carboxylase，PC，EC 6.4.1.1)廣泛存在于動物、霉菌和酵母的線粒體中，催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，是糖異生過程的*個限速酶，在保證血糖的動態(tài)平衡方面起著重要的作用。

測定原理：
    PC催化丙酮酸、ATP、CO2和水生成草酰乙酸、ADP和Pi，蘋果酸脫氫酶進一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+，在340nm下測定NADH氧化速率，即可反映PC活性

需自備的儀器和用品：
    分光光度計/酶標儀、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

操作步驟：

一、 樣本的前處理組織、細菌或細胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離： 1、 稱取約0.1g 組織或收集500 萬細菌或細胞，加入1mL 提取液，用冰浴勻漿器或研缽勻漿。 2、 將勻漿600g，4℃離心5min。 3、 棄沉淀，將上清液移另一離心管中，11000g，4℃離心10min。 4、 上清液即胞漿提取物，可用于測定從線粒體泄漏的PC（此步可選做）。 5、 在步驟④的沉淀中加入1mL 提取液，超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3秒，間隔10 秒，重復30 次），用于線粒體PC 活性測定。

二、測定步驟 1、 分光光度計預熱30min 以上，調(diào)節(jié)波長340nm，蒸餾水調(diào)零。

2、 工作液的配制：臨用前將試劑二和試劑三轉(zhuǎn)移到試劑一中混合溶解待用；置于37℃(哺乳動物) 或25℃(其它物種)預熱5 分鐘；用不完的試劑4℃保存一周；試劑四的配制：在試劑四瓶中加入2.5mL 蒸餾水充分溶解待用；用不完的試劑4℃保存一周；

3、 在1mL 石英比色皿中加入50μL 樣本、50μL 試劑四和900μL 工作液，立即混勻，記錄340nm 處初始吸光值A(chǔ)1 和 2min 后的吸光值A(chǔ)2，計算A=A1-A2。注意：在該試劑盒中，若ΔA 大于0.5，需將樣本用提取液稀釋適當倍數(shù)后測定，使ΔA 小于0.5 可提高檢測靈敏度。計算公式中乘以相應稀釋倍數(shù)。

糖異生系列 丙酮酸羧化酶（PC）測試盒訂購說明：

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨，一般情況下都能訂貨當日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品，需提前1－2日預訂，海外期貨則需要提前3-6周預訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化，若有變動以訂貨當日新價格為準。 
4、每日訂單截止時間為16點整，部分城市可到17點整，因超過截止時間造成當日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后，將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。

運輸說明：

1、極低溫產(chǎn)品：極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來，再用泡沫盒密封，膠帶層層粘住泡沫盒，放入索萊寶的箱子，然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
2、低溫產(chǎn)品：低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來，再使用泡沫盒密封，用膠帶嚴實密封泡沫盒，再放入索萊寶的箱子（保溫效果少可以持續(xù)一周），然后交付給合作快遞，安全快速高效放心的送客戶的手中，保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一，為您的實驗保駕護航。
3、常溫產(chǎn)品：常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨，準確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達您的手中。