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流式細胞儀原理
生物實驗中的封閉劑
流式細胞實驗總結(jié):內(nèi)容包括流式細胞儀 流程、原理、各種類型的樣本操作、樣本準備,以同型對照的理解,及不同情況下如何使用封閉劑等。是本人相當一段時間來的收集以及修正的內(nèi)容。
流式細胞儀(FCM)是八十年代集單克隆抗體、熒光化學、激光、計算機等高技術發(fā)展起來的一種先進儀器,已廣泛應用于免疫學 、生物化學、生物學、腫瘤學以及血液學等方面的研究和臨床常規(guī)工作。其中檢測人白細胞表面標志可對白血病、淋巴瘤作用迅速正確的診斷,對淋巴細胞群和亞群進行分類,還能分離純化某一群或亞群細胞?;罴毎庖邿晒饧夹g是用于FCM檢測的標本準備,染色后也能在熒光顯微鏡下進行觀察,在某些實驗條件下,活細胞免疫熒光染色后的特異性和敏感性要優(yōu)于滴片固定的常規(guī)間接免疫熒光的結(jié)果。
(一) 原理
活細胞表面保留有較完整的抗原 或受體,先用特異性鼠源性單克隆抗體與細胞表面相應抗原結(jié)合,再用熒光標記的第二抗體結(jié)合,根據(jù)所測定的熒光強度和陽性百分率即可知相應抗原的密度和分布。