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【簡(jiǎn)單介紹】
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【詳細(xì)說明】
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相關(guān)知識(shí)>>>>>

抗體的特異性鑒定 :
抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力??贵w的特異性高,它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線,計(jì)算各自的結(jié)合率,求出各自在 IC50時(shí)的濃度,并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。 如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管,而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí),表示 這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為 0,即該血清的特異性較好。<
抗體結(jié)構(gòu):
  抗體是具有4條多肽鏈的對(duì)稱結(jié)構(gòu),其中2條較長(zhǎng)、相對(duì)分子量較大的相同的重鏈(H鏈);2條較短、相對(duì)分子量較小的相同的輕鏈(L鏈)。鏈間由二硫鍵和非共價(jià)鍵聯(lián)結(jié)形成一個(gè)由4條多肽鏈構(gòu)成的單體分子。輕鏈有κ和λ兩種,重鏈有μ、δ、γ、ε和α五種。 整個(gè)抗體分子可分為恒定區(qū)和可變區(qū)兩部分。在給定的物種中,不同抗體分子的恒定區(qū)都具有相同的或幾乎相同的氨基酸序列??勺儏^(qū)位于"Y"的兩臂末端。在可變區(qū)內(nèi)有一小部分氨基酸殘基變化特別強(qiáng)烈,這些氨基酸的殘基組成和排列順序更易發(fā)生變異區(qū)域稱高變區(qū)。高變區(qū)位于分子表面,zui多由17個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成,少則只有2 ~ 3個(gè)。高變區(qū)氨基酸序列決定了該抗體結(jié)合抗原抗原的特異性。一個(gè)抗體分子上的兩個(gè)抗原結(jié)合部位是相同的,位于兩臂末端稱抗原結(jié)合片段(antigen-binding fragment, Fab)。"Y"的柄部稱結(jié)晶片段(crystalline fragment,FC),糖結(jié)合在FC
抗體的效價(jià)鑒定:
不管是用于診斷還是用于治療,制備抗體的目的都是要求較高效價(jià)。不同的抗原制備的抗體,要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多,包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價(jià),一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。多克隆抗體的制備一般包括以下幾個(gè)步驟:
  1、制備抗原。  
 2、選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。
  3、動(dòng)物免疫。  
 4、試取血進(jìn)行測(cè)試,看看是否成功免疫。
  5、如果成功免疫,殺死實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,采集全部血清。
  6、純化出抗體。  
 7、鑒定抗體。包括純度以及特異性。
 
 按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能分類:
  按理化性質(zhì)和生物學(xué)功能,可將其分為IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五類。
  IgM抗體是免疫應(yīng)答中首先分泌的抗體。它們?cè)谂c抗原結(jié)合后啟動(dòng)補(bǔ)體的級(jí)聯(lián)反應(yīng)。它們還把入侵者相互連接起來,聚成一堆便于巨噬細(xì)胞的吞噬;
  IgG抗體激活補(bǔ)體,中和多種毒素。IgG持續(xù)的時(shí)間長(zhǎng),是*能在母親妊娠期穿過胎盤保護(hù)胎兒的抗體。他們還從乳腺分泌進(jìn)入初乳,使新生兒得到保護(hù);
  IgA抗體進(jìn)入身體的黏膜表面,包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜,中和感染因子。還可以通過母乳的初乳把這種抗體輸送到新生兒的消化道黏膜中,是在母乳中含量zui多,zui為重要的一類抗體;
  IgE抗體的尾部與嗜堿細(xì)胞、肥大細(xì)胞的細(xì)胞膜結(jié)合。當(dāng)抗體與抗原結(jié)合后,嗜堿細(xì)胞與肥大細(xì)胞釋放組織胺一類物質(zhì)促進(jìn)炎癥的發(fā)展。這也是引發(fā)速發(fā)型過敏反應(yīng)的抗體;
  IgD抗體的作用還不太清楚。它們主要出現(xiàn)在成熟的B淋巴細(xì)胞表面上,可能與B細(xì)胞的分化有關(guān)。
(IgD于1995年從人骨髓瘤蛋白中發(fā)現(xiàn),分子量為175kD,主要由扁桃體、脾等處漿細(xì)胞產(chǎn)生,人血清中IgD濃度為3~40μg/ml,不到血清總Ig的1%,在個(gè)體發(fā)育中合成較晚。IgD鉸鏈區(qū)很長(zhǎng),且對(duì)蛋白酶水解敏感,因此IgD半衰期很短,僅2.8天。血清中IgD確切的免疫功能尚不清楚。在B細(xì)胞分化到成熟B細(xì)胞階段,除了表達(dá)SmIgD,抗原刺激后表現(xiàn)為免疫耐受。成熟B細(xì)胞活化后或者活化后或者變成記憶B細(xì)胞時(shí),SmIgD逐br/>


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