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蔗糖/57-50-1/SUCROSE/M117-1KGelisa實(shí)驗(yàn)步驟：1. 加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。2. 棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加檢測(cè)溶液A工作液 100μl（在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），酶標(biāo)板加上覆膜, 37℃反應(yīng)60分鐘。3. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，大約400μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。 4. 每孔加檢測(cè)溶液B工作液（同檢測(cè)A工作液） 100μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃反應(yīng)60分鐘。5. 溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干（也可輕拍將孔內(nèi)液體拍干）。6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標(biāo)板加上覆膜37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度蘭色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)，此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后立即進(jìn)行檢測(cè)。對(duì)可溶性抗原而言，為了增強(qiáng)其免疫原性或改變免疫反應(yīng)的類(lèi)型、節(jié)約抗原等目的，常采用加佐劑的方法以刺激機(jī)體產(chǎn)生較強(qiáng)的免疫應(yīng)答。乳化好的標(biāo)志是取一滴乳化劑滴入水中呈現(xiàn)球形而不分散。elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。通過(guò)方法與實(shí)驗(yàn)室之間的測(cè)量預(yù)比對(duì)可以確認(rèn)各方法與實(shí)驗(yàn)室在實(shí)驗(yàn)條件、操作程序方面已經(jīng)得到了很好的控制，之間的*性較好。測(cè)量預(yù)比對(duì)通常采取與所研制標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)基體相同或近似、濃度水平相近的另一份均勻樣品來(lái)進(jìn)行，而不能采取所研制的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品。

名稱(chēng)：蔗糖
品牌：AMRESCO
Item Description：SUCROSE
Code：M117-1KG
級(jí)別：蛋白組學(xué)級(jí)
CAS：57-50-1
Size：1KG
Shipping Temperature：RT
Hazardous Shipping Charges Apply*：No
Hazard Label for Container*：NONE
UN#*：
UNSPSC #：12352200
Shelf Life from Date of Manufacture**：4 years
Parent Category：Proteomics
Child Category：
Grade：PROTEOMICS GRADE


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衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來(lái)表示。交叉反應(yīng)率可用競(jìng)爭(zhēng)抑制試驗(yàn)測(cè)定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競(jìng)爭(zhēng)抑制曲線(xiàn)，計(jì)算各自的結(jié)合率，求出各自在 IC50時(shí)的濃度，并按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。elisa組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，緩沖液中可加入1μg/L蛋白酶抑制劑或50U/ml的Aprotinin（抑肽酶）。用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清置于-20度或- 70度保存，如有必要，可以將樣品濃縮干燥。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。elisa濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。zui多見(jiàn)的是“三抗"陽(yáng)性：“抗-HBs+、抗-HBe、和抗- HBc+"，這說(shuō)明乙肝病毒感染結(jié)束，體內(nèi)病毒清除，提示這個(gè)人免疫功能十分正常，可以獻(xiàn)血，也可以應(yīng)用他的血制造高效價(jià)乙肝免疫球蛋門(mén)（HBIG），用于對(duì)乙肝的防治。 elisa酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定（見(jiàn)酶標(biāo)記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法"（包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。指抗原與相應(yīng)抗體之間所發(fā)生的特異性結(jié)合反應(yīng)。這種反應(yīng)即可在機(jī)體內(nèi)進(jìn)行，也可以在機(jī)體外進(jìn)行。
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