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激光共聚焦顯微鏡的原理及優(yōu)點(diǎn)
閱讀：5927 發(fā)布時(shí)間：2016-6-20
激光共聚焦顯微鏡廠家LEXT OLS4100 全新的多層模式則可以識(shí)別多層樣品各層上反射光強(qiáng)度的峰值區(qū)域，并將各層設(shè)為焦點(diǎn)，這樣即可實(shí)現(xiàn)對(duì)透明樣品上表面的觀察和測(cè)量，而且也可以對(duì)多層樣品的各層進(jìn)行分析和厚度測(cè)量。
激光共聚焦顯微鏡優(yōu)點(diǎn)
1、以激光為光源，在相應(yīng)的熒光探針標(biāo)記后，對(duì)樣本進(jìn)行逐點(diǎn)掃描，逐層獲得二維光學(xué)橫斷面圖像，具有“細(xì)胞CT”的功能，并可通過(guò)計(jì)算機(jī)三維重建軟件支持，獲得三維圖像，并可以任意角度旋轉(zhuǎn)，觀察細(xì)胞，組織立體形態(tài)和空間關(guān)系；
2、可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行無(wú)損傷的觀察，動(dòng)態(tài)測(cè)量細(xì)胞內(nèi)的Ca離子濃度和pH值等活細(xì)胞生理信息；
3、可對(duì)細(xì)胞膜的流動(dòng)性，細(xì)胞間通訊，細(xì)胞融合，細(xì)胞骨架彈性測(cè)量等，可用作“光刀子”完成細(xì)胞內(nèi)“外科手術(shù)”。這一技術(shù)可以對(duì)活細(xì)胞和組織進(jìn)行原位動(dòng)態(tài)定量的觀察和測(cè)量。
與傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡相比， 激光共聚焦顯微鏡 具有更高的分辨率，實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒獾耐瑫r(shí)可觀察并可形成清晰的三維圖像等優(yōu)點(diǎn)
工作原理
傳統(tǒng)的光學(xué)顯微鏡使用的是場(chǎng)光源，標(biāo)本上每一點(diǎn)的圖像都會(huì)受到鄰近點(diǎn)的衍射或散射光的干擾；激光共聚焦顯微鏡利用激光束經(jīng)照明針孔形成點(diǎn)光源對(duì)標(biāo)本內(nèi)焦平面的每一點(diǎn)掃描，標(biāo)本上的被照射點(diǎn)，在探測(cè)針孔處成像，由探測(cè)針孔后的光點(diǎn)倍增管（PMT）或冷電耦器件（cCCD）逐點(diǎn)或逐線接收，迅速在計(jì)算機(jī)監(jiān)視器屏幕上形成熒光圖像。照明針孔與探測(cè)針孔相對(duì)于物鏡焦平面是共軛的，焦平面上的點(diǎn)同時(shí)聚焦于照明針孔和發(fā)射針孔，焦平面以外的點(diǎn)不會(huì)在探測(cè)針孔處成像，這樣得到的共聚焦圖像是標(biāo)本的光學(xué)橫斷面，克服了普通顯微鏡圖像模糊的缺點(diǎn)。
激光共聚焦顯微鏡是采用激光作為光源，在傳統(tǒng)光學(xué)顯微鏡基礎(chǔ)上采用共軛聚焦原理和裝置，并利用計(jì)算機(jī)對(duì)所觀察的對(duì)象進(jìn)行數(shù)字圖象處理的一套觀察、分析和輸出系統(tǒng)。把光學(xué)成像的分辨率提高了30%~40%，使用紫外或可見(jiàn)光激發(fā)熒光探針，從而得到細(xì)胞或組織內(nèi)部微細(xì)結(jié)構(gòu)的熒光圖像，在亞細(xì)胞水平上觀察生理信號(hào)及細(xì)胞形態(tài)的變化，成為形態(tài)學(xué)，分子生物學(xué)，神經(jīng)科學(xué)，藥理學(xué)，遺傳學(xué)等領(lǐng)域中新一代的研究工具。
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