流感疫苗生產(chǎn)的純化過程和設(shè)備

時間：2011-7-11閱讀：2762

流感疫苗生產(chǎn)的純化過程：

1. 已培養(yǎng)好的帶病毒的雞胚用75％酒精消毒；

2. 收集雞胚尿囊液：根據(jù)雞蛋大小收集量略有不同（每只6－10ml）；

3. 尿囊液初濾JST型10μm濾芯過濾；

4. 連續(xù)流離心機(jī)或超濾系統(tǒng)過濾

a. 連續(xù)流離心機(jī)：用12,000rpm，流量：每分鐘600－800ml，除去雜質(zhì)，上清液用于透析濃縮；

b. Millipore超濾系統(tǒng)，0.45μm濾膜，除去雜質(zhì)

5. 尿囊液的透析濃縮：用Millipore超濾器，1000KD膜包濃縮，濃縮后通常為尿囊液量的1/30；

6. 超速離心的病毒純化（略）；

7. 福爾馬林脫毒；

8. 乙醚裂解；

9. 100KD透析脫糖；

10. 去福爾馬林；

11. 去乙醚……

12. 幾種流行病毒抗原的混合（如H1N1+H3N2+H2N2）和稀釋

13. 加入穩(wěn)定劑

14. 成品

離心純化需要準(zhǔn)備的儀器和基本材料：

1. 儀器

a. 阿貝折射儀 Abbe refractometer （測蔗糖濃度）

b. Cole parmer 軟管泵：KH-77913-25

c. 紫外分光光度計或核酸蛋白分析儀（有280nm，260nm波長的），可以是帶流動池及記錄儀，也可以是帶標(biāo)準(zhǔn)樣品池的）

2. 梯度液

a. PB緩沖液PH7.3

b. 30％ w/w蔗糖液（Sucrose，Sigma，AR級）

c. 55％ w/w蔗糖液

d. 58％ w/w蔗糖液

3. 實驗器具

a. 50ml有刻度玻璃管 100支

b. 500ml有刻度燒杯 5支

c. 100ml有刻度燒杯 5支

d. 1000ml有刻度量筒 3只

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