法氏囊抗體檢測(cè)試劑盒

                                        使用說明書

臨床意義

      雞傳染性法氏囊病是由傳染性法氏囊病病毒（Infectious bursal disease virus，IBDV）引起雞的一種急性、高度接觸性傳染病。本病主要特征是突然發(fā)病、病程短、發(fā)病率高、病雞嚴(yán)重萎頓、白色下痢、法氏囊B淋巴細(xì)胞損傷、雞體免疫能力受到抑制，雞感染后體內(nèi)會(huì)產(chǎn)生特異性抗體。檢測(cè)特異性法氏囊抗體可作為該病疫苗免疫狀況及輔助診斷指標(biāo)。

       本試劑盒采用法氏囊抗原作固相抗原檢測(cè)雞血清中的特異性法氏囊抗體。本試劑靈敏度高，特異性強(qiáng)，重復(fù)性好，操作方便快速，可分多次使用。

試劑組成

1.預(yù)包被板48T/96T;                             6.樣本稀釋液（5號(hào)液）1支;

2.酶結(jié)合物（1號(hào)液）1支;                          7. 終止液（6號(hào)液）1支;

3.洗滌液（2號(hào)液）1支;                             8. 陽(yáng)性對(duì)照品1支;

4.底物（3號(hào)液）1支;                                9. 陰性對(duì)照品1支;

5.顯色劑（4號(hào)液）1支;                            10.使用說明書1份;

操作程序

1. 樣本稀釋：用樣本稀釋液（5號(hào)液）將待檢血清按1:100稀釋,如5ul血清＋500ul樣本稀釋液，充分混勻。陰、陽(yáng)對(duì)照不用稀釋。

2. 加樣反應(yīng)：樣本檢測(cè)孔每孔分別加已稀釋樣本血清100ul。同時(shí)設(shè)陰性、陽(yáng)性及空白對(duì)照各一孔，取陰性、陽(yáng)性對(duì)照各100ul分別加入反應(yīng)孔內(nèi)，空白對(duì)照孔僅加入100ul樣本稀釋液（5號(hào)液）。37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，每孔加洗滌液（2號(hào)液）一滴，立即用蒸餾水注滿，靜置30秒后甩去，再直接用蒸餾水洗滌四次，甩去，拍干。

3. 加酶反應(yīng)：除空白對(duì)照孔外其余每孔加酶結(jié)合物（1號(hào)液）二滴，37℃避光反應(yīng)30分鐘后甩去孔內(nèi)液體，如上洗滌，拍干。

4. 顯色反應(yīng)：加底物（3號(hào)液）和顯色劑（4號(hào)液）各一滴，混勻，37℃下避光顯色10分鐘。加終止液（6號(hào)液）一滴，混勻，終止反應(yīng)（加終止液后藍(lán)色會(huì)變?yōu)辄S色）。

結(jié)果判斷

1.肉眼觀察：陰性對(duì)照接近無(wú)色，陽(yáng)性對(duì)照呈明顯黃色，表示試驗(yàn)有效。待檢孔接近無(wú)色表示該標(biāo)本為陰性，待檢孔呈明顯黃色表示該標(biāo)本為陽(yáng)性。

2.儀器判斷：以空白對(duì)照調(diào)零用酶標(biāo)儀于450nm（620nm作參比波長(zhǎng)）讀取O.D值，待檢孔O.D值大于陰性對(duì)照2.1倍者為陽(yáng)性。當(dāng)陰性對(duì)照O.D值低于0.05時(shí)按0.05計(jì)算。

注意事項(xiàng)

1.試劑盒在2-8℃下保存，每次取出時(shí)先平衡至室溫后使用。滴瓶每次用后一定要將蓋擰緊，各瓶蓋之間切不可混用。各試劑盒之間不可混用。

2.洗滌時(shí)將蒸餾水加滿孔內(nèi)，每次停放三十秒鐘后甩去孔內(nèi)液體。禁用自來水等其它水源。

3.為提高試驗(yàn)的可比性建議使用儀器判讀結(jié)果，并對(duì)陰性對(duì)照測(cè)復(fù)孔以減少誤差。

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