腸致病性大腸桿菌核酸檢測(cè)試劑盒
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腸致病性大腸桿菌核酸檢測(cè)試劑盒
廣州健侖生物科技有限公司
產(chǎn)品規(guī)格:48T/盒;
保存條件:避光 -20度 保存。
我司提供各種流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、冠狀病毒、輪狀病毒、桿菌、鏈球菌、熱帶病毒等等核酸檢測(cè)試劑盒(PCR-熒光探針?lè)ǎ?/strong>,還有各種原料和質(zhì)控品,隨時(shí)歡迎您的來(lái)電: 楊
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腸致病性大腸桿菌核酸檢測(cè)試劑盒
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將針筒放入一支15ml離心理中,針筒拿只的喺離心管口上。1600g離心4分鐘,凝膠扤實(shí)后,補(bǔ)加Sephadex G-50凝膠懸液,重復(fù)此步直至凝膠柱高度達(dá)針筒0.9ml刻度處。
4)100ul STE緩沖液洗柱,1600g離心4min。重復(fù)三次。
5)倒咗佢離心理中嘅溶液之后,將一去打嘅1.5ml離心理置于理中,再將裝填咗Sephadex G-50凝膠嘅針筒插入離心理中,針筒口踏正1.5ml離心理。
6)將識(shí)認(rèn)嘅DNA樣品加25 ul STE,拎出0.5ul點(diǎn)樣于DE8 paper上,其余上呀于層析柱上。
7)1600g離心4min,DNA將瀉畀有冇收集喺去打嘅離心理中,而未摻入DNA嘅dNTP篇保留喺層析柱中。攞0.5ul己純化嘅探針點(diǎn)樣于DE8-paper。
8)量過(guò)活性(試劑過(guò)工作要求:106cpm/ml)。
9.預(yù)雜交:
1)將預(yù)雜交液?jiǎn)针s交爐中68℃預(yù)熱,并漩渦令未溶解嘅物質(zhì)溶解。
2)加適當(dāng)嘅ULRAhyb到雜交理中(以100cm2膜積加10mlULRAhyb雜交液),42℃預(yù)雜交4 hr。
10.探針變性:
1)用10 mM EDTA將探針稀釋10倍。
2)90℃熱處理稀釋后探針10min后,即刻放置于雪上5min。
3)短暫離心,將溶液有冇收集到理底。
11.雜交:
1)加0.5ml ULTRAhyb到變性嘅探針中,撈勻之后,將探針加到預(yù)雜交液中。
2)42℃雜交過(guò)夜(14~24hr)。
雜交完之后,將雜交液有冇收集起身于-20℃保存。
12.洗膜:
1)低嚴(yán)緊性洗膜:加Low Stringency Wash Solution#1(100cm2膜積加20ml洗膜溶液),室溫下,震緊洗膜5min兩次。
2)高嚴(yán)緊性洗膜:加High Stringency Wash Solution#2(100cm2膜積加20ml洗膜溶液),42℃震緊洗膜20min兩次。
13.曝光:
1)將膜由洗膜液中拎出,用保鮮膜包住,以防止膜糠。
2)檢查膜上核衰變強(qiáng)度,預(yù)曝光時(shí)間
3)將X光相底覆蓋與膜上,曝光
4)沖洗X光相底,掃描紀(jì)錄結(jié)果。
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