品 牌：Qiagen
英文名稱：DNeasy mericon Food Kit
中文名稱：食品基因組DNA提取試劑盒
從富集微生物的培養(yǎng)基、食物原材料或成品中提取高品質(zhì)DNA
改良了CTAB方法，可更快的處理樣本
從食物成品中高效的純化DNA片段
快速、高效的裂解革蘭氏陰性和陽性細(xì)菌
處理復(fù)雜食物樣本時不會殘留PCR抑制劑

食品基因組DNA提取試劑盒

食品基因組DNA提取試劑盒mericon Sample Preparation Kits適用于從多種初始材料中提純高品質(zhì)核酸，如經(jīng)富集的培養(yǎng)基（mericon DNA Bacteria和 Bacteria Plus Kits）及多種食物原材料與成品（DNeasy mericon Food Kit）等。這些復(fù)雜食物樣本的純化產(chǎn)物中所含PCR抑制劑的水平達(dá)到最低。純化獲得的DNA適用于各種下游應(yīng)用，如應(yīng)用mericon PCR Assays Kits進(jìn)行real-time PCR成分鑒定、病原體檢測；或GMO DNA定量檢測。

 

特點	參數(shù)
應(yīng)用	PCR, real-time, genotyping
洗脫體積	100 µl (mericon DNA Bacteria and DNA Bacteria Plus Kit), 150 µl (DNeasy mericon Food Kit)
規(guī)格	spin columns (DNeasy mericon food Kit), microcentrifuge tube (DNA Bacteria Kit), icrocentrifuge tube with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit)
主要樣本類型	fod, e.g. chocolate, ketchup, cereals (DNeasy mericon Food Kit), bacterial culture from food (DNA Bacteria Kit and DNA Bacteria Plus Kt)
處理	manual
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白	DNA
樣本量	1 ml culture (DNA Bacteria and Bacteria Plus Kit), 2 g (DNeasy mericon Food Kit)
技術(shù)	silica technology (DNeasy mericon food Kit), boiling lysis (DNA Bacteria Kit), disruption with glass beads (DNA Bacteria Plus Kit)
每次運行或制備時間	20 minutes - 1 hour (DNeasy mericon Food Kit)
產(chǎn)量	depends on DNA contents of the sample

 

性能

DNeasy mericon Food Kit

生產(chǎn)過程中，食物容易受到熱、高壓和pH值變化的影響，這些會導(dǎo)致DNA降解和片段化。DNeasy mericon Food Kit中的優(yōu)化試劑專為回收短的DNA片段（100 bp）而設(shè)計，確保高度片段化的DNA可被有效分離，并在PCR反應(yīng)中進(jìn)行擴(kuò)增。憑借這些優(yōu)勢，DNeasy mericon Food Kit是*個可廣泛應(yīng)用于從強(qiáng)抑制性、多脂、酸性、有很高或很低DNA含量的加工食物中純化核酸的試劑盒，結(jié)果可靠，而且可得到純化效果（參見High yields of DNA with minimal inhibitor carryover）。

mericon DNA Bacteria和DNA Bacteria Plus Kits

熱裂解操作需使用mericon DNA Bacteria Kit，機(jī)械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit，兩種試劑盒從革蘭氏陰性細(xì)菌中提取DNA的效率相同。但是，如果從革蘭氏陽性細(xì)菌中提取DNA，機(jī)械裂解更加有效（參見Efficient bacterial DNA extraction）。

原理

DNeasy mericon Food Kit

該試劑盒采用改良的CTAB純化細(xì)胞內(nèi)核酸。CTAB是非離子去污劑，廣泛用于從多種類型的組織樣本中高效提純細(xì)胞內(nèi)核酸。與鹽濃度相關(guān)，CTAB可能與細(xì)胞內(nèi)核酸結(jié)合（低鹽濃度）；也可與細(xì)胞內(nèi)的抑制劑結(jié)合，如多糖、蛋白質(zhì)和植物代謝產(chǎn)物（高鹽濃度，如在Food Lysis Buffer中）。

這種提純方法的步驟少于傳統(tǒng)CTAB 操作方法，應(yīng)用DNeasy mericon Food Kit可在2.5個小時內(nèi)可處理多達(dá)30個樣本（參見Efficient and rapid DNA extraction）。

經(jīng)優(yōu)化的方案，采用CTAB和蛋白酶K初步消化緊密組織，然后同時沉淀蛋白質(zhì)和其他細(xì)胞內(nèi)和來自于食品本身的抑制劑。

離心后抑制劑沉淀下來，而提純的DNA保留在溶液中。然后進(jìn)行l(wèi)v仿抽提，所有剩余的、未沉淀CTAB結(jié)合蛋白、CTAB結(jié)合雜質(zhì)或 CTAB 結(jié)合多糖都將與其他脂溶性抑制劑一起被抽提入lv仿層。水層中含有DNA和極少的抑制劑，將進(jìn)一步處理。在水相中加入結(jié)合緩沖液（調(diào)節(jié)結(jié)合條件），將其上樣到QIAquick Spin Column。純化后得到的DNA可即用于下游的mericon real-time PCR分析。

mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit

到目前為止，檢測食品病原體的主要方法是通過培養(yǎng)基和/或ELISA分析法。分子檢測方法，尤其是real-time PCR，經(jīng)常作為這些常用方法的補充。

熱裂解使用mericon DNA Bacteria Kit，適用于多數(shù)易于裂解的革蘭氏陰性細(xì)菌（如沙門氏菌Salmonella spp.、彎曲桿菌Campylobacter spp. 和阪崎氏腸桿菌Cronobacter spp.）。機(jī)械裂解需使用mericon DNA Bacteria Plus Kit，適用于革蘭氏陽性細(xì)菌，如單增李斯特菌Listeria spp.。

mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit中的化學(xué)試劑可較高程度上提高裂解效率，穩(wěn)定提純的DNA，并去除可能干擾下游應(yīng)用的抑制劑。

操作流程

DNeasy mericon Food Kit

使用簡單的操作方法，從勻質(zhì)的食物樣本中提純DNA，獲得的純DNA適用于各種下游應(yīng)用，如real-time PCR成份分析或GMO檢測。

mericon DNA Bacteria Kit和mericon DNA Bacteria Plus Kit

使用機(jī)械裂解（鋼珠）和熱裂解（煮）的操作方法，從病原體富集的培養(yǎng)基中提純細(xì)菌DNA。兩種操作方法都需轉(zhuǎn)移細(xì)菌 DNA懸浮液，以適用于real-time PCR病原體檢測。

應(yīng)用

應(yīng)用DNeasy mericon Food Kit從食物原材料或成品中純化的DNA適用于各種下游應(yīng)用，如成份鑒定。

mericon Bacteria和Bacteria Plus Kits用于從經(jīng)過增菌富集培養(yǎng)基中純化細(xì)菌DNA。 

 

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