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廣州健侖生物科技有限公司

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廣州健侖生物科技有限公司>>動(dòng)物疫病診斷>>禽疫病檢測(cè)>> 禽腦脊髓炎抗體檢測(cè)試劑盒
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禽腦脊髓炎抗體檢測(cè)試劑盒

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  • 廣州健侖生物科技有限公司
  • 2015-06-13 11:20:53
  • 廣州市
  • 中國(guó)
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我要詢(xún)價(jià)

【簡(jiǎn)單介紹】

用來(lái)檢測(cè)雞血清中的禽傳染性支氣管炎病毒(IBV)抗體

【詳細(xì)說(shuō)明】

 

【用途】
用來(lái)檢測(cè)雞血清中的禽腦脊髓炎病毒(AEV)抗體

【試驗(yàn)原理】
禽腦脊髓炎,也稱(chēng)雛雞傳染性顫搐病,主要通過(guò)雞蛋傳播,感染雞和易感雞或成年禽之間亦可發(fā)生水平傳播。青年雞(1~4周齡)主要臨床表現(xiàn)為共濟(jì)失調(diào)、麻痹或頭頸快速震顫等癥狀,成年雞表現(xiàn)為產(chǎn)蛋能力下降。血清中的病毒抗體可通過(guò)酶聯(lián)免疫的方法檢測(cè)。血清中的AEV抗體水平及整個(gè)雞群的免疫狀況可用ELISA方法進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
將滅活的AEV抗原包被在微孔板上,加入稀釋后的血清并孵育,血清中的抗AEV抗體將與包被在微孔板上的AEV結(jié)合,形成AEV抗原-抗體復(fù)合物。然后洗掉未結(jié)合的物質(zhì),加堿性磷酸酶標(biāo)記的抗雞IgG的酶標(biāo)結(jié)合物至微孔板中,酶標(biāo)物將與AEV抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。孵育后洗掉未結(jié)合的結(jié)合物,然后加入底物溶液。底物與堿性磷酸酶反應(yīng)并生成一種有顏色的產(chǎn)物,zui后終止反應(yīng),將顏色固定。顏色的深淺可用酶標(biāo)儀(405-410nm)測(cè)定。

【一個(gè)微孔板所需的試劑的量】

抗原包被微孔板
12×8條(板)
樣品稀釋液(
120ml
洗滌液(
500ml
陽(yáng)性對(duì)照
2μl
陰性對(duì)照
2μl
結(jié)合物
12ml
底物液
12ml
終止液
12ml



【所需物品】
1. 
能夠吸取2μl100μl800μl的精確移液器
2. 
zui大吸取100μl的多通道移液器
3. 
計(jì)時(shí)器
4. 
量筒
5. 
蒸餾水
6. 
洗板機(jī)
7. 
稀釋用容器
8. 
能夠讀雙波(405-410nm630-650nm)的酶標(biāo)儀,OD值讀數(shù)zui大可達(dá)到3.0

【樣品收集】
采集至少0.5ml全血,分離血清并放在冰箱里,2-7用于短期儲(chǔ)存,如果長(zhǎng)期儲(chǔ)存,應(yīng)冷凍,且避免反復(fù)凍溶。如果樣品含有可見(jiàn)的顆粒物質(zhì),應(yīng)在檢測(cè)之前將其離心除去,嚴(yán)重污染的樣品不允許使用(如高度渾濁、細(xì)菌污染等)

【結(jié)果計(jì)算】
將陽(yáng)性對(duì)照吸光度值和樣品吸光度值分別減去陰性對(duì)照吸光度值,注意:對(duì)照品及樣品吸光度值都應(yīng)該是2個(gè)重復(fù)孔的平均值。每個(gè)樣品的計(jì)算式如下:

樣品平均吸光度值陰性對(duì)照吸平均吸光度值
=樣品與陽(yáng)性對(duì)照比值(Sp
陽(yáng)性對(duì)照平均吸光度值陰性對(duì)照平均吸光度值

Sp ×100)= ELISA Unit (EU)              陽(yáng)性對(duì)照值設(shè)為100 EU

【結(jié)果判定及EU單位說(shuō)明】
AEV ELISA
                        說(shuō)明
小于15EUs                            AEV抗體為陰性
15-25 EUs                             AEV
抗體為弱陽(yáng)性,應(yīng)被認(rèn)為經(jīng)過(guò)免疫或暴露于AEV,油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
25-75 EUs                             AEV
抗體適度陽(yáng)性
75 EUs                              AEV抗體強(qiáng)陽(yáng)性
【操作步驟】
1. 
將試劑回溫至室溫,通過(guò)顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 
1樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中,充分混勻,例如,30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 
120×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中,充分混勻,例如,25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 
稀釋前將陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品震蕩均勻。
5. 
陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl 800μl。將移液器調(diào)到100μl,反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 
將稀釋后的陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照分別加入微孔中,每種做兩個(gè)平行,每孔100μl;將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中,室溫下靜置30分鐘。
7. 
棄去微孔板中溶液,每孔加入300μl洗滌液洗滌,重復(fù)洗滌2次,在洗滌過(guò)程中防止酶標(biāo)板變干。
8. 
每孔立即加入100μl結(jié)合物,室溫靜置30分鐘。
9. 
重復(fù)步驟7進(jìn)行洗板。
10. 
每孔立即加入100μl底物,室溫靜置30分鐘。
11. 
不要倒掉板內(nèi)液體,每孔立即加入100μl終止液。
12. 
用酶標(biāo)儀雙波讀數(shù)(405nm410nm作為主要波長(zhǎng),630nm650nm為參考波長(zhǎng)),計(jì)算結(jié)果。
【公司名稱(chēng)】廣州健侖生物科技有限公司
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【電子郵件】 Service@jianlun.com
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禽疫病檢測(cè)系列產(chǎn)品(健侖生物榮譽(yù)出品)

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產(chǎn)品名稱(chēng)
產(chǎn)品規(guī)格
檢測(cè)方法
禽病檢測(cè)系列
JL3101
雞新城疫抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3102
雞新城疫抗原金標(biāo)檢測(cè)卡
20T/
金標(biāo)層析卡
JL3103
雞新城疫抗體金標(biāo)檢測(cè)卡
20T/
金標(biāo)層析卡
JL3104
新城疫血凝及血凝抑制試驗(yàn)抗原
2ml
用于禽新城疫免疫效果的監(jiān)測(cè)
JL3105
新城疫血凝及血凝抑制試驗(yàn)陽(yáng)性血清
2ml
JL3106
新城疫病毒RT/-PCR檢測(cè)試劑盒
10T/
PCR
JL3401
法氏囊抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3402
法氏囊抗體金標(biāo)檢測(cè)卡
40T/
金標(biāo)層析卡
JL3403
法氏囊抗原金標(biāo)檢測(cè)卡
40T/
金標(biāo)層析卡
JL3107
禽腦脊髓炎抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3108
禽呼腸孤抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3110
鴨禽流感病毒抗體檢測(cè)試劑盒
96T/盒
 ELISA JL
JL3601
雞傳染性喉氣管炎抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3602
雞傳染性喉氣管炎抗體金標(biāo)檢測(cè)卡
40T/
金標(biāo)層析卡
JL3701
雞減蛋綜合癥EDS76抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3702
雞減蛋綜合癥EDS76抗體金標(biāo)檢測(cè)卡
40T/
金標(biāo)滲濾卡
JL3801
雞病毒性關(guān)節(jié)炎抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3010 禽流感病毒RT-PCR檢測(cè)試劑盒  96T/盒 ELISA JL
JL3011
禽流感抗體檢測(cè)試劑盒
96T/
ELISA JL
JL3012
禽流感抗原金標(biāo)檢測(cè)卡
20T/
金標(biāo)層析卡
JL3013
禽流感H5抗原金標(biāo)檢測(cè)卡
20T/
金標(biāo)層析卡
JL3014
禽流感H9抗體金標(biāo)檢測(cè)卡
20T/
金標(biāo)層析卡

    
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