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鴨瘟病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/h1>
- 發(fā)布日期：
- 有效日期：
- 所 在 地：
- 產(chǎn) 地：
- 已獲點(diǎn)擊：
- 2024年11月7日
- 2025年5月7日
- 廣東廣州市
- 廣州
- 268次
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【產(chǎn)品簡(jiǎn)介】
【詳細(xì)說(shuō)明】
鴨瘟病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>
（我司同時(shí)有登革熱，克錐蟲(chóng)，絲蟲(chóng)，非洲錐蟲(chóng)，恙蟲(chóng)，無(wú)形體，立次克體，基孔肯熱，寨卡病毒，黃熱病檢測(cè)試劑盒，各種質(zhì)控品，抗原，）
【產(chǎn)品名稱】
通用名稱：鴨瘟病毒核酸檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針?lè)ǎ?/span>
英文名稱：Detection Kit for Avian Influenza Virus Subtype H5 RNA (PCR-Fluorescence Probing)
【包裝規(guī)格】大包裝，24 反應(yīng)/盒；大包裝，48 反應(yīng)/盒
需自備的試劑：核酸提取試劑
質(zhì)控品說(shuō)明：陽(yáng)性質(zhì)控品為含目的片段的重組質(zhì)粒，使用時(shí)無(wú)需進(jìn)行核酸提取。
【儲(chǔ)存條件及有效期】
試劑盒保存于-20±5℃，有效期 9 個(gè)月。
試劑盒在 37℃可保存72h；試劑在 4℃可保存7天；避免反復(fù)凍融，反復(fù)凍融次數(shù)不超過(guò) 7 次；試劑開(kāi)瓶次數(shù)不超過(guò) 7 次。運(yùn)輸采用干冰保持低溫，運(yùn)輸時(shí)間不應(yīng)超過(guò) 3 天。試劑盒生產(chǎn)日期見(jiàn)產(chǎn)品標(biāo)簽。
【適用儀器】ABI 7500、ABI 7300、LightCycler480 等熒光定量 PCR 儀。
【樣本要求】
新城疫病毒核酸檢測(cè)試劑盒
- 適用樣本類(lèi)型：咽喉拭子、泄殖腔拭子、肌肉或臟器樣本等。
- 樣品采集與前處理（注意無(wú)菌操作）
- 活禽樣品——取咽喉拭子和泄殖腔拭子，或新鮮糞便拭子，具體采集方法如下：·咽喉拭子，采取時(shí)要將拭子深入喉頭及上腭裂來(lái)回刮3～5次，取咽喉分泌液；·取泄殖腔拭子時(shí)，將拭子深入泄殖腔轉(zhuǎn)一圈沾取糞便；對(duì)于易造成損傷的小珍禽，直接用拭子沾取適量新鮮糞便；·將咽喉拭子和泄殖腔拭子一起放入盛有1.0ml PBS的Eppendoff管中，編號(hào)備用。
- 內(nèi)臟或肌肉樣品——用無(wú)菌鑷剪夾取待檢樣品2.0g于研缽中充分研磨，再加10mlPBS混勻，或置于組織勻漿器中，加入10mlPBS勻漿，然后將組織懸液轉(zhuǎn)入無(wú)菌Eppendoff管中3,000 rpm離心10 min，取上清液轉(zhuǎn)入Eppendoff管中，編號(hào)備用。
3. 保存與運(yùn)送
請(qǐng)遵循目前的流感標(biāo)本采集方案以及標(biāo)準(zhǔn)的流感標(biāo)本儲(chǔ)存、包裝和運(yùn)送標(biāo)準(zhǔn)和相應(yīng)的航空運(yùn)輸協(xié)會(huì)的規(guī)定。
【檢驗(yàn)方法】
1.樣本處理和核酸提?。颖咎幚韰^(qū)）
建議取 200μl 液態(tài)樣本進(jìn)行核酸提??；組織樣本可以研磨液進(jìn)行提取操作?？刹捎猛ㄓ玫暮怂崽崛≡噭┖?，請(qǐng)按照試劑盒說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作；也可選擇其他合適的商業(yè)化產(chǎn)品。
本試劑盒中的陰性質(zhì)控品參與提取，用于對(duì)環(huán)境進(jìn)行監(jiān)控；AIV H5 陽(yáng)性質(zhì)控品不參與提取，用于 PCR 檢測(cè)試劑的質(zhì)控。
3.3 LightCycler480 儀器設(shè)置
- 點(diǎn)擊軟件主界面的“New Experiment”,進(jìn)入程序設(shè)定界面。
檢測(cè)模式設(shè)置：從 Detection Format 的下拉框中選擇分析模式：Multi Color Hydrolysis Probe,“Customizes”模塊中選擇 483-533 濾片組合，“Block Type”為儀器自動(dòng)檢測(cè)， “Plate ID”可手工輸入或掃描儀掃描，“Reaction Volume”設(shè)定為 25ul。
- 循環(huán)參數(shù)：定義 PCR 程序中每個(gè)步驟（Program Name）及循環(huán)數(shù)(Cycles)和分析模式(Analysis Mode),利用“+”和“-”增加或刪除步驟，擴(kuò)增參數(shù)如下
50℃ 15 分鐘，1 個(gè)循環(huán)；
95℃ 15 分鐘，1 個(gè)循環(huán)；
94℃ 15 秒* 58℃ 45 秒，40 個(gè)循環(huán)；（此步采集熒光信號(hào)：“Analysis Mode”選擇“Quantification”,“Acquisition Mode”選擇“Single”）
40℃ 10 秒，1 個(gè)循環(huán)；
- 填樣品表：點(diǎn)擊“SampleEditor”模塊，進(jìn)入樣本信息編輯界面，在“SelectWorkflow”中選擇“AbsQuant”,在“SampleName”
列中定義樣本名稱,在“Sample Type”欄中選定樣品類(lèi)型：陰性質(zhì)控品選 NTC；未知樣品選 Unknown。
- 運(yùn)行程序：點(diǎn)擊“Experiment”模塊，回到程序設(shè)定界面，點(diǎn)擊窗口右下方的“StartRun”,彈出結(jié)果保存窗口，輸入文件名和路徑后進(jìn)入程序運(yùn)行界面。
4. 結(jié)果分析
4.1 反應(yīng)結(jié)束后保存檢測(cè)數(shù)據(jù)文件。
4.2 分析條件設(shè)置：根據(jù)分析后圖像調(diào)節(jié) Baseline 的 start 值、stop 值以及 Threshold 的 Value 值（用戶可根據(jù)實(shí)際情況自行調(diào)整， Start 值可以在 3～15、End 值可設(shè)在 5～20，調(diào)整陰性對(duì)照的擴(kuò)增曲線平直或低于閾值線），點(diǎn)擊 Analysis 自動(dòng)獲得分析結(jié)果，在 Report 界面察看結(jié)果。
4.質(zhì)量控制
陰性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線無(wú)對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期；陽(yáng)性質(zhì)控品：擴(kuò)增曲線有明顯對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期，且 Ct 值≤32；
以上要求需在同一次實(shí)驗(yàn)中同時(shí)滿足，否則，本次實(shí)驗(yàn)無(wú)效，需重新進(jìn)行。
5.結(jié)果判定
1. 如果檢測(cè)樣品的擴(kuò)增曲線無(wú)對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期或 Ct 值＞38，可判樣品為禽流感 H5 亞型陰性；
2. 如果檢測(cè)樣品 Ct 值≤38，且曲線有明顯的對(duì)數(shù)增長(zhǎng)期，可判樣品為禽流感 H5 亞型陽(yáng)性。
【檢測(cè)方法的局限性】
樣本檢測(cè)結(jié)果和樣本收集、處理、運(yùn)送及保存質(zhì)量有關(guān)，其中任何失誤都將會(huì)導(dǎo)致假陰性結(jié)果。如果樣本處理時(shí)沒(méi)有控制好交叉污染，可能出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。
【產(chǎn)品性能指標(biāo)】
根據(jù)產(chǎn)品分析性能評(píng)估結(jié)果，本試劑盒的靈敏度為 1.0×103copies/ml。與感染部位相同或感染癥狀相似的其他病原體（副流感病毒、新城疫病毒、呼吸道合胞病毒、腺病毒等）無(wú)交叉反應(yīng)。
【注意事項(xiàng)】
1.本產(chǎn)品僅用于體外診斷；
2.實(shí)驗(yàn)室管理應(yīng)嚴(yán)格按照 PCR 基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的管理規(guī)范，實(shí)驗(yàn)人員必須進(jìn)行專(zhuān)業(yè)培訓(xùn)，實(shí)驗(yàn)過(guò)程嚴(yán)格分區(qū) 進(jìn)行（試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本制備區(qū)、擴(kuò)增和產(chǎn)物分析區(qū)），所用消耗品應(yīng)滅菌后一次性使用，實(shí)驗(yàn)操作的每個(gè) 階段使用的儀器和設(shè)備，各區(qū)各階段用品不能交叉使用；
3.為試劑和標(biāo)本準(zhǔn)備階段提供生物安全柜，實(shí)驗(yàn)過(guò)程中穿工作服，帶一次性手套，使用自卸管移液器；
4.試劑使用前要*解凍，8,000rpm 離心數(shù)秒后使用；
5.標(biāo)本制備區(qū)所用過(guò)的吸頭請(qǐng)打入盛有消毒劑的容器，并與廢棄物一起滅菌后方可丟棄；
6.實(shí)驗(yàn)完畢用 10%次氯酸或 75%酒精處理工作臺(tái)和移液器,然后用紫外線燈照射 20－30 分鐘；
7.本試劑盒內(nèi)陽(yáng)性質(zhì)控品應(yīng)視為具有傳染性物質(zhì)，操作和處理均需符合相關(guān)法規(guī)要求：衛(wèi)生部《微生物生物
醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》和《醫(yī)療廢物管理?xiàng)l例》。
新城疫病毒/禽流感病毒核酸檢測(cè)試劑盒
廣州創(chuàng)侖禽流感病毒通用型核酸檢測(cè)試劑盒 禽流感病毒H9亞型核酸檢測(cè)試劑盒
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