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應(yīng)用簡介

裸鼠皮下荷瘤是指將人源或鼠源細(xì)胞注射到免疫缺陷的裸鼠皮下，通過施加藥物或其它條件來驗證細(xì)胞成瘤或轉(zhuǎn)移能力的實驗方法。裸鼠腫瘤模型是研究腫瘤學(xué)、免疫學(xué)、藥品與生物制品的安全性評價以及有效性篩選等研究課題的基礎(chǔ)。
裸鼠皮下成瘤模型

裸鼠是具有一定免疫缺陷的小鼠，利用這一特點可以將腫瘤細(xì)胞移植到裸鼠皮下或體內(nèi)，腫瘤細(xì)胞可以吸收裸鼠自身的營養(yǎng)進(jìn)行生長或轉(zhuǎn)移而不會被小鼠免疫細(xì)胞殺傷，利用這一特點可以研究腫瘤細(xì)胞在有機體內(nèi)成瘤能力、藥物對腫瘤細(xì)胞殺傷能力等問題。
實驗方法

 

技術(shù)總結(jié)

在裸鼠荷瘤實驗操作中有幾點需要特別注意：

▲細(xì)胞狀態(tài)對成瘤影響很大，在計劃做荷瘤實驗時務(wù)必確保細(xì)胞處于一個較好的狀態(tài)，一般注射細(xì)胞數(shù)目不少于1*10⁶個。

▲雖然裸鼠具有一定的免疫缺陷，但并不等于wan全沒有排異反應(yīng)，一般選擇年齡不超過7周齡的裸鼠進(jìn)行實驗，年齡太大可能會影響成瘤效果。

▲注射位點的選擇也有一定技巧性，一般選擇裸鼠腋下位置注射是因為這個位置血流豐富，易于短時間成瘤。
問題解答

▲瘤子長不出來是怎么回事？

一方面可能是細(xì)胞狀態(tài)差，活力不好，或是腫瘤細(xì)胞不易成瘤，需加入Matrigel輔助或增大接種量或更換細(xì)胞系；一方面可能是小鼠周齡太大，或小鼠免疫排斥，建議更換免疫缺陷程度更大的小鼠（Nod-scid小鼠，NOG小鼠＞Nude裸鼠）

▲小鼠瘤子長起來又消失？

腫瘤塊先縮小，后變大很常見，很可能是炎癥反應(yīng)，腫瘤細(xì)胞被小鼠自身吸收，繼續(xù)觀察腫瘤細(xì)胞吸收之后是否經(jīng)過幾周還能長出來，長不起來建議換鼠。

▲均一性很差，腫瘤體積差距較大？

如果荷瘤分組發(fā)現(xiàn)小鼠腫瘤體積差距很大，這可能跟小鼠周齡及接種細(xì)胞量不一致導(dǎo)致，建議重新做實驗分組。

▲是否可以在一只小鼠進(jìn)行多個點荷瘤？ 

不可以，一只老鼠就只能接種一個點。因為一個老鼠身上有多個腫瘤塊的情況下，可能會相互影響。

▲是否應(yīng)用免疫抑制劑加速腫瘤生長

如果裸鼠荷瘤不生長，可以參考文獻(xiàn)，用免疫抑制劑如環(huán)磷酰胺（抑制裸鼠NK細(xì)胞活性）促進(jìn)生長；不過最好不要為了縮短造模周期來加速生長，因為可能會造成潰爛，這樣就不得不中止實驗。所以一般情況下，應(yīng)盡量符合細(xì)胞系本身的生長特性，不應(yīng)過多地人為的干擾。