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色譜裝柱機(jī)應(yīng)用及工作原理

閱讀:848      發(fā)布時(shí)間:2016-10-31
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色譜裝柱機(jī)應(yīng)用及工作原理
 
以填裝5um 硅膠 4.6×250 分析柱為例
連接裝柱所需空壓機(jī)和色譜裝柱機(jī),確保裝柱機(jī)工作時(shí)機(jī)身穩(wěn)固;
稱(chēng)取填料3.0-3.5g (4.6×250 分析柱標(biāo)準(zhǔn)需要2.8g,經(jīng)驗(yàn)3.2g比較合適);
用40-50ml異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1)溶解填料,用玻璃棒攪拌均勻后用超聲波超3分鐘, 以確保其分散性;
迅速將上述混合液倒入勻漿罐(盡量短時(shí)間內(nèi)完成該工序并確保勻漿罐內(nèi)無(wú)氣泡),如勻漿罐不滿(mǎn)再用異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1)補(bǔ)滿(mǎn),理想情況是不需要再補(bǔ)充異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1),熟練后可知需要多少原料,所需原料的梁與溫度、填料溶解性有關(guān);
迅速將勻漿罐和柱子連接到泵上以60MPA的壓力,以甲醇(化學(xué)純)做流動(dòng)相開(kāi)啟裝柱機(jī),保持裝柱機(jī)在60MPa壓力下工作20分鐘;
減壓至30MPa運(yùn)行5-10分鐘,緩慢降壓至系統(tǒng)無(wú)壓力靜止3分鐘;
卸下柱子看柱頭部分是否平整,如不平整用美工刀鏟平(很需要技術(shù)的步驟);
將柱子接入液相色譜儀,用甲醇(色譜級(jí))以1.0流速運(yùn)行30分鐘;
開(kāi)始檢驗(yàn)色譜柱效;
多次熟練此工作,以提高裝柱質(zhì)量。

備注: 異丙醇(或異丙醇與乙腈比例1:1)至少分析純;
甲醇為控制成本可用化學(xué)純,但事先需要經(jīng)過(guò)0.2um有機(jī)濾膜過(guò)濾;
工作開(kāi)始前開(kāi)啟裝柱機(jī)用流動(dòng)相甲醇沖洗管路,盡量確保管路中無(wú)氣泡。

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