cambcollabs三螺旋肽簡介

CambCol實驗室合成膠原樣三螺旋肽用于研究用途。它們有不同的結(jié)構(gòu)形式，用于不同的目的，但它們的關(guān)鍵共同特征是[GXX']n基序，這是

三螺旋組件。我們的大多數(shù)肽含有GPP或GPO重復(fù)序列（Gly-Pro-Pro或Gly-Pro-Hyp）。

這些富含亞氨基酸的序列形成穩(wěn)定的三螺旋結(jié)構(gòu)，在高于37°C（通常為45-50°C）的溫度下熔化（展開）[1,2]。我們制造以GPP或GPO重復(fù)序列為主要成分的肽，

它保持三螺旋結(jié)構(gòu)，以及另一個序列（例如結(jié)合整合素的GFOGER基序）作為客體序列插入GPP或GPO宿主序列框架的肽[3]。在很多情況下，

在N端和C端都包含含有Cys的三聯(lián)體，以允許出于特定目的交聯(lián)Cys殘基巰基[4]。這是我們受體特異性肽的常見形式。

為您的特定應(yīng)用格式化的肽：

•對于蛋白質(zhì)或細(xì)胞結(jié)合分析的表面涂層，含半胱氨酸的肽可能是好的。自發(fā)形成的二硫化物可能會導(dǎo)致肽的低聚合物的存在，其中協(xié)同結(jié)合會促進(jìn)表面吸附[5]。在我們手中，用于蛋白質(zhì)結(jié)合研究的96孔板在這種情況下工作良好。

例如i-II-28，GPC[GPP]5GPP霧劑[GPP]5GPC酰胺

•如果肽僅在溶液中使用，那么不含Cys的三聯(lián)體宿主序列可能是好的，因為不會發(fā)生自發(fā)氧化聚合[5]。競爭結(jié)合分析中使用的此類肽[4,6]，

例如，它將產(chǎn)生更簡單的結(jié)合動力學(xué)。

例如Si-II-28、[GPP]5G霧劑[GPP]5-酰胺

•使用肽制備蛋白質(zhì)-肽復(fù)合物用于結(jié)構(gòu)研究，最小化肽的長度可能是有用的。在這種情況下，[GPO]3宿主序列允許相對較短但同樣穩(wěn)定的肽

待生產(chǎn)（Tm）≥ 20攝氏度[7]。N-末端的乙酰化通過消除鏈間電荷排斥提高穩(wěn)定性。這種策略可能適用于使用4°C結(jié)晶條件的晶體學(xué)研究，但較長的肽、[GPO]4宿主將為室溫結(jié)晶提供更高的熱穩(wěn)定性。

例如Ci-II-28、[GPO]2霧劑[GPO]3-酰胺

•衍生肽，例如含有熒光素或其他熒光團(tuán)，或含有生物素，可用于細(xì)胞表面標(biāo)記研究。

例如Fi-II-28，F(xiàn)ITC-[GPP]5G霧劑[GPP]5-酰胺

•膠原工具包，包含膠原II、膠原III或膠原XIII COL結(jié)構(gòu)域全序列的重疊三螺旋肽庫，可用于將膠原結(jié)合蛋白映射到

這些膠原蛋白的主要序列[2,8,9]。我們可以提供預(yù)先涂在96孔板上的工具包，或者我們可以在實驗室與您合作，繪制目標(biāo)蛋白質(zhì)的結(jié)合位點。

一個例子是II-28，GPC[GPP]5geagaoglvgprgergfogersogaq[GPP]5GPC酰胺

如果你的配體結(jié)合位點已知，可以提供單獨的工具包肽，我們將與你合作，在未知的地方更緊密地定義結(jié)合位點。CambCol Laboratories已經(jīng)接管了美國劍橋法恩代爾實驗室collagentoolkit網(wǎng)站的權(quán)益。

搬運(yùn)和儲存

肽粉

•在-20°C（零下20°C）下儲存，粉末肽將無限期保存。我們提供了所提供肽的準(zhǔn)確重量（通常為1.1毫克），您應(yīng)在0.01M醋酸中溶解至至少2.5毫克/毫升。

在4°C下儲存一晚，以便在使用前形成完整的三螺旋。你可以等分，比如說20µl的批次，快速冷凍，并根據(jù)你的喜好在-20°C（零下20°C）或-80°C（零下80°C）下儲存。

•您的工作庫存小份可在+4°C（+4°C）下儲存，以便立即使用（最多4周）。避免長時間儲存稀釋溶液（<1 mg/ml），否則肽可能會因吸附到管壁或在非常稀釋的溶液中展開三螺旋而丟失。

•避免多次重新冷凍和解凍，因為這可能會導(dǎo)致肽沉淀。如果你能在溶液中看到顆粒物質(zhì)（肽聚集體），*旋渦（2分鐘）以分散它們。

或者，你可以用超聲波檢查，注意不要讓管子過熱。CRP-XL以溶液形式提供

•我們可以提供CRP-XL作為粉末，按上述方式處理，或作為冷凍溶液≥ 在0.01M醋酸中加入2.5mg/ml。你可以解凍、等分、速凍，并將等分保存幾個月。解凍時，檢查

可見聚集體的存在。如果存在，通過上述大范圍渦流和/或超聲波分散。

•不要加熱CRP-XL懸浮液（一些方案要求對非交聯(lián)肽進(jìn)行熱變性，以恢復(fù)單鏈狀態(tài)，然后通過冷卻重新折疊）。我們認(rèn)為這一過程將是有害的

對于CRP-XL，由于變性但交聯(lián)的肽不太可能準(zhǔn)確地重新折疊。