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ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)時(shí)操作留意事項(xiàng)

閱讀:106          發(fā)布時(shí)間:2016-7-21

  對(duì)于ELISA試劑盒的每一步都要留意才行。 ELISA試劑盒加樣時(shí)的防錯(cuò)小經(jīng)驗(yàn) (1)用一張寫滿字的紙,字越多越好,比方報(bào)紙,墊在下面,這么,加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會(huì)變小,沒加的字正常,十分簡(jiǎn)單差異。 (2)能夠利用液面反光與沒有加的孔加以差異 (3)在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也能夠加以差異 3、棋盤實(shí)驗(yàn)的操作方法: (1)將抗原按必定的梯度倍比稀釋后,按照ELISA從上到下(或許從左到右)的順序包被。 (2)將抗體按必定的梯度倍比稀釋后按照ELISA試劑盒從左到右或許從上到下參加。 (3)二抗的稀釋倍數(shù)是必定的,然后顯色,讀值。 OD值的測(cè)守時(shí),波長(zhǎng)要依據(jù)顯色劑的不一樣而定,通常上我們都運(yùn)用TMB顯色,450nm讀值。依據(jù)讀值得成果能夠選定適宜的抗原和抗體效價(jià),這即是棋盤 實(shí)驗(yàn)的意圖,假如抗原包被量已知而二抗的工作濃度不確定的話就用一抗和二抗作棋盤實(shí)驗(yàn)。
留意事項(xiàng)

1.ELISA試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可運(yùn)用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保留。

2.濃洗刷液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗刷時(shí)不影響成果。

3.各步加樣均應(yīng)運(yùn)用加樣器,并常常校正其準(zhǔn)確性,以避免實(shí)驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)刻*控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運(yùn)用排槍加樣。

4.請(qǐng)每次測(cè)定的一起做規(guī)范曲線,*做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于規(guī)范品孔孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋必定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,核算時(shí)請(qǐng)zui終乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。

5.封板膜只限一次性運(yùn)用,ELISA試劑盒以避免穿插污染。

6.底物請(qǐng)避光保留。

C8orf30A    8號(hào)染色體開放閱讀框30a抗體
CYP11A1    細(xì)胞色素P450 11A1抗體
CPT1A    肉毒堿棕櫚?;D(zhuǎn)移酶1A抗體
CDC42    細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體
Phospho-CDC42 (Ser71)    磷酸化細(xì)胞分化周期CDC42蛋白抗體
CAP2    環(huán)化酶相關(guān)蛋白CAP-2抗體
CD15    階段特異性胚胎表面抗原-1抗體
C20orf202    20號(hào)染色體開放閱讀框202抗體
CCL28    粘膜相關(guān)上皮趨化因子28抗體

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