詳細介紹
具體步驟:
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據(jù)腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網(wǎng)過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
一、細胞基本屬性 | |
細胞名稱 | 大鼠卵巢顆粒細胞 |
組織來源 | 卵巢組織 |
商品貨號 | A01X1624 |
種屬來源 | 大鼠 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 |
細胞簡介 | 大鼠卵巢顆粒細胞分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結(jié)構(gòu),而所有鳥類只有左側(cè)卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。卵巢顆粒細胞是卵巢的主要功能細胞,其增殖與分化直接影響著卵泡的生長啟動、發(fā)育、排卵、黃體形成以及甾體激素分泌等卵巢功能活動。卵巢顆粒細胞是卵泡內(nèi)的大細胞群,也是主要的功能細胞,卵泡發(fā)育的顯著標志之一就是顆粒細胞迅速生長及增殖,而成年動物的卵泡閉鎖主要是由顆粒細胞凋亡引起,尤其在卵泡發(fā)育后期,此外,顆粒細胞還與卵泡膜細胞共同完成卵巢激素的合成,維持著有利于卵母細胞生長和成熟的微環(huán)境。細胞形狀呈圓形或橢圓形。 |
包被條件 | PLL(0.1mg/ml) |
培養(yǎng)基 | 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等 |
換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
生長特性 | 貼壁 |
細胞形態(tài) | 上皮細胞樣 |
傳代特性 | 可傳1-2代 |
消化液 | 0.25%胰蛋bai酶 |
培養(yǎng)條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
注意事項:
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。
原代細胞培養(yǎng):
原代細胞(Primary cells):是指直接從機體取出的組織或細胞獲得單個細胞并在體外進行培養(yǎng)的細胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。
原代細胞培養(yǎng):由于原代細胞生長緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(一般10代以內(nèi))。所以一般認為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。
公司產(chǎn)品僅供科研研究實驗
公司正在出售的產(chǎn)品:
大鼠纖維環(huán)細胞 | 帶小棒鏈霉菌Streptomycesclavuligerus |
小鼠腸成纖維細胞 | 多刺鏈霉菌Streptomycesechinatus |
兔胃粘膜上皮細胞 | 羊毛鏈霉菌Streptomyceslanatus |
人羊膜成纖維細胞 | 馬杜拉放線菌Actinomadura madurae |
小鼠結(jié)膜成纖維細胞 | 乙型溶血性鏈球菌Streptococcus hemolytis-β |
兔牙周膜干細胞 | 綠膿假單胞菌(銅綠假單胞菌)Pseudomonas aeruginosa |
大鼠毛囊角質(zhì)細胞 | 乙型副沙門氏菌Salmonella paratyphi B |
兔小膠質(zhì)細胞 | 福氏志賀氏菌Shigella flexneri |
兔結(jié)腸成纖維細胞 | 色葡萄球菌Staphylococcus aureus |
兔肝實質(zhì)細胞 | 大腸埃希氏菌Escherichia coli |
兔輸尿管平滑肌細胞 | 冬蟲夏草Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G.H. Sung J.M. Sung Hywel-Jones |
豬膀胱平滑肌細胞 | 白假絲酵母Candida albicans |
大鼠T淋巴細胞 | 大鼠卵巢顆粒細胞肺炎克雷伯氏菌肺炎亞Klebsiella pneumoniae ssp pneumoniae |
小鼠纖維環(huán)細胞 | 色葡萄球菌金黃亞種Staphylococcus aureus subsp.aureus |
小鼠結(jié)腸成纖維細胞 | 糞鏈球菌Enterococcus faecalis |