硫堇-橘紅G植物組織染色液公司正在銷售的產(chǎn)品：綿羊XVII型膠原(COL17)試劑盒Anti-ELF4 Antibody腫瘤壞死因子-α抗原
綿羊泛素連接酶E3A (UBE3A)試劑盒 Anti-ELK1 Antibody腫瘤壞死因子-β抗原
綿羊原纖維蛋白2(FBN2)試劑盒Anti-ELF4 Antibody腫瘤壞死因子α誘導(dǎo)蛋白1抗原
綿羊胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)試劑盒 Anti-E

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn)，咨詢并訂購(gòu)！

產(chǎn)品分類：植物染色

儲(chǔ)存條件：室溫,避光,12個(gè)月

用途：主要由硫堇染色液、橘紅G染色液組成，木質(zhì)化組織被染成藍(lán)色，纖維細(xì)胞被染成黃綠色，細(xì)菌被染成藍(lán)色，可以用于Synchytrium、Peronospora、Phytophthora、Sclerotinia、Botrytis、Puccinia、Fusarium、Diplodia等真菌的染色

注意事項(xiàng)：因材料種類、切片厚薄的不同，染色時(shí)間也不同。同時(shí)要注意酒精脫色的程度。

 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理：

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因；

EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑，基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理：稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。

配制步驟：

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來(lái)水、純水洗凈，烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標(biāo)線，搖勻。

 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定：

1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性

2.對(duì)照品溶液的配制：精密量取腦對(duì)照品適量，加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。

3.色譜條件：以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱；柱溫120℃；進(jìn)樣口溫度250℃；檢測(cè)器溫度250℃；分流進(jìn)樣，分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法：配制的對(duì)照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液，三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái)，保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%，驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

殺鮭氣單胞菌鈣粘蛋白14抗體Human HOGA1(Probable 4-hydroxy-2-oxoglutaRate aldolase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狼瘡抗凝抗體(IgG)免疫試劑盒

層出鐮孢菌鈣激活離子通道蛋白3抗體Human UNC5C(Netrin receptor UNC5C) ELISA Kit人抗蘭堿受體鈣釋放通道抗體免疫試劑盒

大腸埃希氏菌CD200受體抗體Human SUSD2(Sushi domain-containing protein 2) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體免疫試劑盒

Pseudomonas psychrotolerans彈性蛋白1抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgM)免疫試劑盒

粗皮側(cè)耳（平菇）干生長(zhǎng)因子受體/表面分化抗原抗體Human ZNF654(Zinc finger protein 654) ELISA Kit人抗狂犬病(RV)抗體(IgG)免疫試劑盒

秦氏蜜環(huán)菌CD99樣蛋白2抗體Human ERN1(Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE1) ELISA Kit人抗可提取核抗原抗體(ENA-Ab)免疫試劑盒

球毛殼鈣粘蛋白相關(guān)蛋白CTNNA3抗體Human COQ10A(Coenzyme Q-binding protein COQ10 homolog A, mitochondrial) ELISA Kit人抗可溶性肝抗原抗體(SLA)免疫試劑盒

枯草芽孢桿菌緊密連接蛋白15抗體Human PIN1(Peptidyl-prolyl cis-trans isomerase NIMA-interacting 1) ELISA Kit人抗菌肽LL-37 免疫試劑盒

草本枝孢緊密連接蛋白12抗體Human CES5A(Carboxylesterase 5A) ELISA Kit人抗菌肽(CAMP)免疫試劑盒

潔小菇CHIC2蛋白抗體Human PARM1(Prostate androgen-regulated mucin-like protein 1) ELISA Kit人抗菌肽(Attacin)免疫試劑盒

楊奇青霉磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激1抗體Human LETMD1(LETM1 domain-containing protein 1) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgM)免疫試劑盒

青色鏈霉菌磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human FAF2(FAS-associated factor 2) ELISA Kit人抗巨病(CMV)抗體(IgG)免疫試劑盒

短芽孢桿菌磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human SPINK7(Serine protease inhibitor Kazal-type 7) ELISA Kit人抗巨噬抗體(anti-macrophage Ab)免疫試劑盒

蒼黃鏈霉菌磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human MTX3(Metaxin-3) ELISA Kit人抗性磷5b(TRACP-5b)免疫試劑盒

橄欖鏈霉菌磷化周期檢測(cè)點(diǎn)激2抗體Human FAM151A(Protein FAM151A) ELISA Kit人抗抗體(AsAb)免疫試劑盒

E.coli DH5α λpir遺傳性脈絡(luò)膜缺乏癥相關(guān)蛋白抗體Human MTPAP(Poly(A) RNA polymerase, mitochondrial) ELISA Kit人抗角蛋白絲聚集/絲集蛋白抗體(AFA)免疫試劑盒

雜色曲霉Aspergillus│versicolor 質(zhì)量規(guī)格：堿指示劑Ⅰ型膠原C端肽試劑盒澤瀉F

結(jié)核分枝桿菌Mycobacterium│tuberculosis 質(zhì)量規(guī)格：CPⅠ型膠原試劑盒青蒿

假交替單胞菌Pseudoalteromonas│sp. 質(zhì)量規(guī)格：0.981型1-磷鞘受體試劑盒黃芪中分離物
硫堇-橘紅G植物組織染色液CK-MB(Human Creatine Kinase MB isoenzyme) ELISA Kit  人肌suan激mei同工meiMB規(guī)格： 48T

PAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit  人前列腺suan性磷suanmei規(guī)格： 48T

PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit  人前列腺suD合成mei規(guī)格： 48T

PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit  人胃蛋白mei原C規(guī)格： 48T

PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit  人胃蛋白mei原A規(guī)格： 48T

使用方法：

1.  常用篩選濃度

注意：用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型，培養(yǎng)基，生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應(yīng)性曲線，來(lái)確定最佳篩選濃度。

一般而言，哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL；細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株，需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度，可通過(guò)建立殺滅曲線（劑量反應(yīng)曲線）來(lái)實(shí)現(xiàn)，至少選擇5個(gè)濃度。

1）  第一天：未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過(guò)夜；注：對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞，可增加接種量。

2）  根據(jù)細(xì)胞類型，設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例，可設(shè)定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3）  第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。

4）  接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5）  按照固定的周期（如每2天）進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)（通常是7-10天）內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1）  轉(zhuǎn)染48h后，用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。

注意：細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密，其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%

2）  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3）  篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間，這取決于宿主細(xì)胞類型，轉(zhuǎn)染，以及篩選效果。

4）   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5）   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。