產(chǎn)品分類:脂類染色
儲(chǔ)存條件:室溫,避光,12個(gè)月
用途:中性脂肪染色,主要用于顯示組織器官的脂肪變性和類脂質(zhì)的異常沉著。
注意事項(xiàng):主要由蘇丹三、乙醇等組成,染色后脂肪呈橘紅色,細(xì)胞核呈淡藍(lán)色。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡(jiǎn)單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購(gòu)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號(hào) |
蘇丹Ⅲ染色液-C液 | 100ml | FS-R7007 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來(lái)水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對(duì)照品溶液的穩(wěn)定性
2.對(duì)照品溶液的配制:精密量取腦對(duì)照品適量,加無(wú)水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對(duì)照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測(cè)器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對(duì)照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對(duì)照品溶液,三種儲(chǔ)備液同時(shí)稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對(duì)照品的峰面積計(jì)算原對(duì)照品溶液的含量。記錄下來(lái),保證原對(duì)照品溶液含量在考察期相對(duì)平均偏差不超過(guò)2.0%,驗(yàn)證對(duì)照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來(lái)篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長(zhǎng)條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對(duì)于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過(guò)建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來(lái)確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動(dòng)物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過(guò)建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來(lái)實(shí)現(xiàn),至少選擇5個(gè)濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過(guò)夜;注:對(duì)于需要更高密度來(lái)檢測(cè)活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動(dòng)物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個(gè)濃度做三個(gè)平行孔。
4) 接下來(lái)每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來(lái)確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長(zhǎng)的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來(lái)傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時(shí)抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過(guò)于稠密,其效率會(huì)降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過(guò)25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評(píng)估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時(shí)間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個(gè)抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
枯草芽孢桿菌色P450Ⅱj3抗體Human DTX3L(E3 ubiquitin-protein ligase DTX3L) ELISA Kit兔多肽YY(PYY)免疫試劑盒
類干酪乳桿菌鈣激活離子通道4抗體Human E2F4 ELISA Kit兔對(duì)氧磷-1(PON1)免疫試劑盒
毛栓孔菌周期依賴性激6抗體Human EDAR ELISA Kit兔乙酰轉(zhuǎn)移(CHAT)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌周期依賴性激7抗體Human EDC3 ELISA Kit兔超氧化物歧化1,可溶(SOD1)免疫試劑盒
黑曲霉3.3928周期依賴性激8抗體Human EDC4 ELISA Kit兔超氧化物歧化[Mn],線粒體(SOD2)免疫試劑盒
米根霉周期蛋白依賴激抑制因子1C抗體Human E2F7 ELISA Kit兔超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)免疫試劑盒
馬杜放線菌Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣抗體Human E2F8 ELISA Kit兔叉頭框蛋白P3(FOXP3)免疫試劑盒
總狀共頭霉c-fos抗體Human DNAJC2/MPP11 ELISA Kit兔補(bǔ)體片斷5a(C5a)免疫試劑盒
釀酒酵母嗜鉻粒A抗體Human DAPK1 ELISA Kit兔補(bǔ)體蛋白3(C3)免疫試劑盒
多根硬皮馬勃CGRP降鈣基因相關(guān)肽抗體Human DOCK180 ELISA Kit兔二(MDA)免疫試劑盒
釀酒酵母ChAT乙酰轉(zhuǎn)移抗體Human DPPA4 ELISA Kit兔半胱蛋白抑制劑/胱抑C(Cys-C)免疫試劑盒
大葉胡枝子腐朽病周期蛋白N端結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體Human DCBLD2 ELISA Kit兔白介7(IL7)免疫試劑盒
銅綠假單胞菌(綠膿桿菌)肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白CORO1A抗體Human DCC(Netrin receptor DCC) ELISA Kit兔白介-5(IL-5)免疫試劑盒
大豆慢生根瘤菌抗菌肽/天蠶抗體Human DcR2 ELISA Kit兔白介17(IL-17)免疫試劑盒
豬瘟病間接ELISA抗體鈣/鈣調(diào)蛋白依賴蛋白激IG抗體Human CTRP4 ELISA Kit兔白介12(IL-12/P70)免疫試劑盒
多粘類芽胞桿菌表面趨化因子受體8抗體Human CST1 ELISA Kit兔白蛋白(Albumin)免疫試劑盒
谷棒桿菌Corynebacterium│glutamicum 質(zhì)量規(guī)格:>99%,BRRNA結(jié)合蛋白FUS試劑盒蘿卜硫苷
灰平鏈霉菌Streptomyces│griseoplanus 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRRho家族GTP1試劑盒藜蘆
CFCC1087資源名稱: 蘇云金芽胞桿菌東北亞種 質(zhì)量規(guī)格:>98%,BRRho關(guān)聯(lián)含卷曲螺旋蛋白激2試劑盒硫秋仙苷
蘇丹Ⅲ染色液-C液GR- Alpha(Human glucocorticoid receptor- Alpha) ELISA Kit 人糖皮質(zhì)激su受體α規(guī)格: 48T
u-T3(Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine) ELISA Kit 人高敏三碘jia狀腺原氨suan規(guī)格: 48T
LHRH(Human Luteinizing Hormone-Releasing Hormone) ELISA Kit 人黃體生成su釋放激su規(guī)格: 48T
8-iso-PG(Human 8-iso prostaglandin) ELISA Kit 人8異前列腺su規(guī)格: 48T
Human Renin ELISA Kit 人腎su規(guī)格: 48T