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詳細介紹
產品分類：細胞培養(yǎng)
儲存條件 4℃,6個月
用途 聚乙二醇誘導細胞融合，可用作融合劑,以獲得單克隆抗體的雜交瘤細胞,誘導細胞雜交
注意事項 無菌溶液,由DPBS(pH7.4)和PEG8000或稱聚乙二醇8000組成,經無菌處理。體外培養(yǎng)的單層貼壁細胞或懸浮細胞均可以做融合，但成功概率較大的是單層貼壁細胞。
公司產品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點，咨詢并訂購！
產品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
PEG8000溶液 | 10ml | FS-R6391 |
配制與標定的實驗原理：
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因；
EDTA是四元酸，是一種白色晶體粉末，常用H4Y表示，溶解度很小，室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑，基準試劑的預處理：稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層，然后用水洗凈，烘干。
配制步驟：
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中，用0.1mol·L-1 HCl溶液（自配）清洗1min，再用自來水、純水洗凈，烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15～0.2g Zn，蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸，待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁，小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中，用純水稀釋至標線，搖勻。
實驗方法與判定：
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制：精密量取腦對照品適量，加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液，作為對照品溶液。
3.色譜條件：以交聯鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱；柱溫120℃；進樣口溫度250℃；檢測器溫度250℃；分流進樣，分流比10:1。理論塔板數按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法：配制的對照品溶液，一份置冷處保存，一份置室溫中保存，在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液，三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法，并依據新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來，保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%，驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
使用方法：
1. 常用篩選濃度
注意：用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據細胞類型，培養(yǎng)基，生長條件和細胞代謝率而變化，推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線（kill curve），即劑量反應性曲線，來確定最佳篩選濃度。
一般而言，哺乳動物細胞50-500μg/mL；細菌/植物細胞20-200μg/mL；真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意：為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株，需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度，可通過建立殺滅曲線（劑量反應曲線）來實現，至少選擇5個濃度。
1） 第一天：未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上，37℃，CO2培養(yǎng)過夜；注：對于需要更高密度來檢測活力的細胞，可增加接種量。
2） 根據細胞類型，設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例，可設定50，100，250，500，750，1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml，然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3） 第二天：替換舊的培養(yǎng)基，換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4） 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5） 按照固定的周期（如每2天）進行活細胞計數來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數（通常是7-10天）內能夠殺死絕大多數細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1） 轉染48h后，用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞（直接傳代或者稀釋后傳代）。
注意：細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密，其效率會降低。為了得到較好的篩選效果，最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2） 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3） 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間，這取決于宿主細胞類型，轉染，以及篩選效果。
4） 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板，繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5） 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)PⅢNP ELISA Kitβ分泌抗體包裝5g
Ⅲ型前膠原基端肽(PⅢNT)PⅢNT ELISA Kit相關死亡促進因子Bad抗體包裝100ml
Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)HPCⅢ ELISA KitBax包裝25ml
Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)Col Ⅲ ELISA Kit程序性死亡配體2抗體包裝500ml
Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)HELIX-Ⅱ ELISA Kit膽汁鹽輸出泵/ATP結合盒轉運蛋白11抗體包裝1g
Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)CTX-Ⅱ ELISA Kitβ2微球蛋白抗體(單抗)包裝1g
Ⅱ型膠原(ColⅡ)ColⅡ ELISA Kit骨/軟骨蛋白多糖1抗體包裝5g
Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)Col Ⅱ ELISA Kit染色體相關蛋白CAP抗體包裝1g
Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)PⅠCP ELISA KitBcl-2同源結構域樣蛋白1抗體包裝250mg
Ⅰ型前膠原N端前肽(PⅠNP)PⅠNP ELISA KitBcl2相關抗凋亡基因6抗體包裝10g
Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)CⅠCP ELISA Kit半乳糖轉移7亞基β1,4抗體包裝50g
Ⅰ型膠原交聯羧基末端肽(ⅠCTP)ⅠCTP ELISA KitBEN結構域蛋白5抗體包裝100g
Ⅰ型膠原N末端肽(NTX)NTX ELISA Kit巴德-畢德氏綜合征蛋白BBS5抗體包裝25g
Ⅰ型膠原C端肽(CTX-Ⅰ)CTX-Ⅰ ELISA Kit癌相關蛋白1抗體包裝500g
Ⅰ型膠原(ColⅠ)ColⅠ ELISA Kit腦蛋白CG6抗體包裝1g
膽汁結合蛋白DDH2抗體促狀腺胚胎因子(TEF)PX-478 是有抗癌活性的缺氧誘導因子-1α (HIF-1α) 抑制劑，對一些癌系 IC50 為 20-30 μM。
PEG8000溶液ELAVL1/HuR/FITC 熒光標記ELAVL1IgG納銅粉 99.9% metals basis,80-0nm
Elastin/Gold 金標記抗彈性蛋白IgG鈷 99.5%，300目
ELK1/FITC 熒光標記轉錄因子ELK1IgG鎳 AR,99.5%
Endo G /FITC 熒光標記核內切GIgG不銹鋼粉 200目
Phospho-ELk1 (Ser383) /FITC 熒光標記兔抗人、大、小鼠化轉錄因子ELK1IgG不銹鋼粉 200目
Emp1/FITC 熒光標記表皮膜蛋白1IgG不銹鋼粉 200目
Endostatin/FITC 熒光標記內皮抑/內皮他丁IgG敵草隆 ，99.5%
envelope glycoprotein Yellow fever virus/FITC 熒光標記抗黃熱病包膜糖蛋白IgG敵草隆 99%
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