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甘油PBS封片劑

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更新時間:2022-07-28 15:55:59瀏覽次數(shù):326

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 10ml
貨號 FS-R7255 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R7255
甘油PBS封片劑公司正在銷售的產(chǎn)品:大鼠白介素1β(IL-1β)試劑盒Anti-NEFM Antibody小鼠可溶性肌球蛋白重鏈1
大鼠白介素2(IL-2)試劑盒Anti-NEK2 Antibody兔主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類
大鼠白介素4(IL-4)試劑盒Anti-NEK5 Antibody人CD4分子
大鼠白介素6(IL-6)試劑盒Anti-NEK5 Antibody兔骨堿性磷酸酶 ELISA

詳細(xì)介紹

產(chǎn)品分類:免疫組化

儲存條件:室溫,12個月

用途:常規(guī)切片和細(xì)胞涂片的封固,亦可以用于免疫組化的封閉

注意事項(xiàng):主要由甘油、磷酸鹽等組成。如果需要長期保存都要用油漆或者中性樹膠進(jìn)行封邊,否則時間長了容易吸水或干燥,使材料變壞。

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

甘油PBS封片劑

10ml

FS-R7255

 

63.jpg 

 

配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。

13.jpg 

 

實(shí)驗(yàn)方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。

4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選

1)  轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

細(xì)枝孢甘脫羧P蛋白抗體Human THRSP ELISA Kit大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)免疫試劑盒

耐輻射奇球菌核孔蛋白GLE1抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠繆勒管抑制物質(zhì)/抗繆勒管激(AMH)免疫試劑盒

交替紅色桿菌屬腎小球上皮蛋白1抗體Human THTPA ELISA Kit大鼠免疫球蛋白M(IgM)免疫試劑盒

柱孢菌屬轉(zhuǎn)錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體Human THUMPD3 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白G(IgG)免疫試劑盒

小棱盤菌麥角蛋白抗體Human TICAM2 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白E(IgE)免疫試劑盒

多主葡萄殼菌膠質(zhì)瘤發(fā)病相關(guān)蛋白1抗體Human TIGD5 ELISA Kit大鼠免疫球蛋白A(IgA)免疫試劑盒

溶淀粉類芽孢桿菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域1/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移1抗體Human THUMPD1 ELISA Kit大鼠絡(luò)(TYR)免疫試劑盒

油菜菌核病菌谷酰酰水解抗體Human TIGD1 ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒

乳白耙菌糖基轉(zhuǎn)移25結(jié)構(gòu)域2/前膠原半乳糖基轉(zhuǎn)移2抗體Human TIMELESS(Protein timeless homolog) ELISA Kit大鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒

大腸埃希菌糖基轉(zhuǎn)移28家族1抗體Human THOC7 ELISA Kit大鼠卵泡抑(FS)免疫試劑盒

東方伊薩酵母糖基轉(zhuǎn)移6結(jié)構(gòu)1抗體Human TIMM10 ELISA Kit大鼠膽固?;D(zhuǎn)移(LCAT)免疫試劑盒

貝酵母膠質(zhì)瘤抑癌候選基因2抗體Human THOC6 ELISA Kit大鼠硫氧還蛋白還原(TrxR)免疫試劑盒

黑曲霉磷化糖皮質(zhì)激受體抗體Human THRAP3 ELISA Kit大鼠硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒

香菇葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白6抗體Human Thrombospondin 3 ELISA Kit大鼠硫乙酰肝蛋白多糖2(HSPG2)免疫試劑盒

明蘇達(dá)被毛孢糖皮質(zhì)激受體β抗體Human SIRT7(NAD-dependent deacetylase sirtuin-7) ELISA Kit大鼠硫類肝(HS)免疫試劑盒

武夷小單孢菌胰島葡萄糖6磷2抗體Human TINP1 ELISA Kit大鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)免疫試劑盒

芽孢桿菌Bacillus│sp. 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0% (GC)芳樟

施氏微桿菌Microbacterium│schleiferi 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用蓮心堿

釀酒酵母Saccharomyces│cerevisiae 質(zhì)量規(guī)格:柱層析用,200-400目蓮心堿高鹽
甘油PBS封片劑PTHrP ELISA Kit   大鼠jia狀旁腺激su相關(guān)蛋白規(guī)格: 48T

ACA-IgG ELISA Kit  大鼠抗心磷脂IgG規(guī)格: 48T

ACA-IgM ELISA Kit  大鼠抗心磷脂IgM規(guī)格: 48T

ACA-IgA ELISA Kit  大鼠抗心磷脂IgA規(guī)格: 48T

AP12 ELISA Kit  大鼠apelin 12規(guī)格: 48T


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