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耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基

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更新時間:2022-07-04 13:43:48瀏覽次數(shù):285

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 500ml
貨號 FS-R6469 應用領域 化工
主要用途 僅供科研 貨號 FS-R6469
耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基公司正在銷售的產(chǎn)品:兔胸腺肽β10(TMSβ10)試劑盒Anti-CYP27A1 Antibody抑癌基因Rbms3抗體
兔Syncollin蛋白(SYCN)試劑盒Anti-CYP2A6 Antibody抵抗素樣分子α抗體
兔抗磷脂抗體(APA)試劑盒 Anti-CYP27A1 Antibody質內的糖基化蛋白抗體
兔絲蛋白酶12(PRSS12)試劑盒Anti-CYP

詳細介紹

63.jpg
產(chǎn)品分類:培養(yǎng)基

儲存條件  4℃,6個月

用途  多用于黑曲霉培養(yǎng)進而產(chǎn)生α-淀粉酶

注意事項  無菌溶液。主要由1.5%可溶性淀粉、1.5%蔗糖、0.3%磷酸二氫鈉、0.01%氯化鈣、0.01%硫酸鐵等組成,亦含有硫酸鎂、檸檬酸氫二銨等,一般pH值為5.0,經(jīng)15psi高壓滅菌20min

公司產(chǎn)品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基

500ml

FS-R6469

 

配制與標定的實驗原理:

1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;

EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。

2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。

配制步驟:

1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。

2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。

3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。

13.jpg 

 

實驗方法與判定:

1.對照品溶液的穩(wěn)定性

2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。

3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。

4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。

使用方法:

1.  常用篩選濃度

注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。

一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。

2. 殺滅曲線的建立

注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。

1)  第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。

2)  根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。

3)  第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。

4)  接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。

5)  按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。

3.   穩(wěn)定轉染細胞的篩選

1)  轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。

注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%

2)  每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。

3)  篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。

4)   挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。

5)   之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。

α-胞襯蛋白(SPTAN1)SPTAN1 ELISA Kit鈣連蛋白抗體包裝500g

α白蛋白(AFM)AFM ELISA Kit二氫嘧啶相關蛋白2抗體包裝50mg

α2-纖溶抑制因子(α2PI)α2PI ELISA Kit色P450ⅡE1抗體包裝1g

α2-巨球蛋白(α2M)α2M ELISA Kit趨化因子受體1抗體包裝100g

α2-HS糖蛋白(αHSG)αHSG ELISA Kit磷化原癌基因c-Raf抗體包裝25g

α1-微球蛋白(α1M)α1M ELISA Kit磷化致癌基因C-Myc抗體包裝500g

α1-性糖蛋白(α1AGP)α1AGP ELISA KitCD33抗體包裝1g

α1-抗(α1AT)α1AT ELISA Kit磷化原癌基因c-kit抗體包裝5g

Zeste同源物增強子1(EZH1)EZH1 ELISA Kit磷化原癌基因c-Jun抗體包裝1g

YY肽(PYY)PYY ELISA Kit離子通道蛋白3抗體包裝25g

X-射線修復交叉互補蛋白6(XRCC6)XRCC6 ELISA Kit磷化周期E抗體包裝5g

X-射線修復交叉互補蛋白5(XRCC5)XRCC5 ELISA Kit磷化分裂周期蛋白25C抗體包裝250mg

X-框結合蛋白1(XBP1)XBP1 ELISA Kit磷化周期依賴性激9抗體包裝1g

Wolfram綜合征蛋白1(WFS1)WFS1 ELISA Kit磷化Connexin 43蛋白抗體包裝5g

WNT1誘導信號通道蛋白1(WISP1)WISP1 ELISA Kit絲切蛋白抗體包裝100g

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:純度98%以上異質性胞核核糖核蛋白G試劑盒乙酰纈草三酯;Acevaltratum

鏈霉菌Streptomyces│sp. 質量規(guī)格:>99%,BR異質性胞核核糖核蛋白E試劑盒乙酰哈巴苷;8-O-Acetylharp

CGMCC1.5361=JCM14000資源名稱: 黃微球菌 質量規(guī)格:含量測定異質性胞核核糖核蛋白D試劑盒異型南五味子丁;Heterocliti
耐酸性α-淀粉酶發(fā)酵培養(yǎng)基Integrin Alpha3/FITC  熒光標記整合α3IgG硅烷 >98.0%(GC)

Integrin Alpha3 Beta1/FITC  熒光標記整合α3β1IgG鄰 AR,98%

Integrin a7/FITC  熒光標記整合α7IgG間 CP

Integrin AlphaE2/CD3 /FITC  熒光標記整合αE2IgG鄰苯二 AR,99.0%

Integrin alpha E2 /FITC  熒光標記整合alpha E2 IgG鄰苯二 CP,98.0%

Integrin AlphaM/CD11b /FITC  熒光標記巨噬表面分子/整合-α2IgG鄰苯二 standard for GC, ≥99.5% (GC)

Integrin avb3/FITC  熒光標記整合avb3IgG2,6-二 99%

Integrin AlphaV Beta5/FITC  熒光標記整合αVβ5IgG2,6-二


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