詳細介紹
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點,咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
淡水藻保存液Ⅲ | 100ml | FS-R7103 |
產(chǎn)品分類:植物染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:含有福爾馬林、乙醇、甘油等。
注意事項:推薦用于淡水藻類的保存。此類保存液不能保色,如需保色,需用此保存液作用1-2天后轉入保色液中長期保存。
配制與標定的實驗原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標準溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標定EDTA標準溶液的工作基準試劑,基準試劑的預處理:稱量前一般應先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標線,搖勻。
實驗方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細管柱;柱溫120℃;進樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計算應不低于10000。
4.實驗方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗證對照品溶液在使用期內穩(wěn)定可靠。
釀酒酵母血栓合成抗體Human AQP9(Aquaporin-9) ELISA Kit人甲狀腺激免疫球蛋白(TSI)免疫試劑盒
粘狀曲霉多癌基因下調蛋白抗體Human AKR1B1(Aldose reductase) ELISA Kit人甲狀旁腺激相關蛋白(PTHrP)免疫試劑盒
白僵菌色C氧化蛋白5B抗體Human ADIPOR1(Adiponectin receptor protein 1) ELISA Kit人甲狀旁腺激1受體(PTH1R)免疫試劑盒
玫瑰考克氏菌色C氧化亞基3抗體Human GP6(Plaet glycoprotein VI) ELISA Kit人甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)抗體免疫試劑盒
棲熱菌屬色C氧化亞基6B抗體Human SOD3(Extracellular superoxide dismutase [Cu-Zn]) ELISA Kit人甲狀旁腺激1-34(PTH 1-34)免疫試劑盒
紫紅曲霉磷化致癌基因C-Myc抗體Human PRDX1(Peroxiredoxin-1) ELISA Kit人甲狀旁腺激(PTH)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌磷化致癌基因C-Myc抗體Human LPCAT3(Lysophospholipid acyltransferase 5) ELISA Kit人甲酰甲硫(fMet)免疫試劑盒
短裙竹蓀1-2色P450 11B1抗體Human OXM(Oxyntomodulin) ELISA Kit人甲肟前列腺D2(PGD2-MOX)免疫試劑盒
麗齒菌屬環(huán)磷鳥苷抗體Human SMAD2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) ELISA Kit人甲基化DNA[蛋白]半胱S甲基轉移免疫試劑盒
多主葡萄殼菌內皮因子維生B12受體抗體Human WNT3A(Protein Wnt-3a) ELISA Kit人甲基化CpG結合蛋白2(MECP2)免疫試劑盒
喜鹽裸囊菌原癌基因cMAF抗體Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit人脊髓灰質炎病抗原(PV)免疫試劑盒
沙鏈霉菌18號染色體開放閱讀框56抗體Human RPESP(RPE-spondin) ELISA Kit人脊髓灰質炎病(PV)抗體(IgG)免疫試劑盒
葡萄座腔菌3號染色體開放閱讀框22抗體Human SEMA3G(Semaphorin-3G) ELISA Kit人己糖激3(HK3)免疫試劑盒
出芽短梗霉19號染色體開放閱讀框46抗體Human OXM(Oxyntomodulin) ELISA Kit人己糖激(HK)免疫試劑盒
微型離心機 (便攜式)原癌基因cMAF抗體Human WNT3A(Protein Wnt-3a) ELISA Kit人幾丁質3樣蛋白1(YKL-40/CHI3L1)免疫試劑盒
產(chǎn)短桿菌電壓依賴性鈣通道Cav2.1抗體Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA Kit人幾丁質1(殼三糖)(CHIT1)免疫試劑盒
20481=ATCC19435=CCM1877=NCDO604=NCIB6681=NCTC6681資源名稱: 乳鏈球菌 質量規(guī)格:IND益母草苷
: HBUM171193資源名稱: 鏈霉菌 質量規(guī)格:ACS乙龍腦酯
: Ye845資源名稱: 小腸結腸炎耶爾森氏菌 質量規(guī)格:BSα-亞麻
淡水藻保存液ⅢANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit 人血管生成su4規(guī)格: 48T
sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit 人可溶性肌球蛋白重鏈1規(guī)格: 48T
HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit 人熱休克因子1規(guī)格: 48T
VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit 人血管活性肽mei抑制劑規(guī)格: 48T
CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1規(guī)格: 48T
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉株的工作濃度需要根據(jù)細胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實驗體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細胞50-500μg/mL;細菌/植物細胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達目的蛋白的細胞株,需要確定能夠殺死未轉染宿主細胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應曲線)來實現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉化的細胞按照20-25%的細胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細胞類型,設定合適范圍內的濃度梯度。以哺乳動物細胞為例,可設定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進行活細胞計數(shù)來確定阻止未轉染細胞生長的恰當濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內能夠殺死絕大多數(shù)細胞的濃度為穩(wěn)定轉染細胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉染細胞的篩選
1) 轉染48h后,用含有適當濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當細胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細胞類型,轉染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉移5-10個抗性克隆于35mm細胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。