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詳細介紹
商品介紹：
測定意義： DAO(EC1.4.3.6)廣泛存在于動物（腸粘膜、肺、肝臟、腎臟等）、植物和微生物中。催化多胺氧化為醛，其活性與核酸和蛋白合成密切相關(guān)，能夠反映腸道機械屏障的完整性和受損傷程度。 測定原理： DAO催化尸胺產(chǎn)生醛和過氧化氫，外源添加過量的辣根過氧化物酶，催化過氧化氫氧化鄰聯(lián)茴香胺生成有色物質(zhì)，在460nm處有特征吸收峰，通過測定該波長吸光度增加速率，計算DAO活性。 需自備的儀器和用品： 天平、低溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
商品屬性：
產(chǎn)品名稱 | |
檢測方法 | 可見分光光度法 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50管/24樣 |
產(chǎn)品貨號 | AS632161 |
試劑的組成和配制：
酸性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；堿性提取液：液體50mL×1瓶，4℃保存；試劑一：液體10 mL×1瓶，4℃保存；試劑二：液體3 mL×1瓶，4℃保存；試劑三：粉劑×1瓶，-20 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑四：粉劑×1瓶，4 ℃保存，用時加入3mL蒸餾水，混勻，用不完的試劑4℃保存一周；試劑五：液體3.6mL×1瓶，4 ℃保存；試劑六：液體30mL×1瓶，4 ℃保存；試劑七：液體50mL×1瓶，4 ℃保存。
自備儀器和用品：
可見分光光度計、臺式離心機、移液器、1 ml玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
NAD+和NADH的提取：
1、血清（漿）中NAD+和NADH的提取 NAD+的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml酸性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑昭澹{）體積（ml）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建 議取約0.1ml血清（漿），加入1ml堿性提取液），95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）； 冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中 和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 2、組織中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提取：按照組織質(zhì)量（g）：酸性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml酸性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提?。喊凑战M織質(zhì)量（g）：堿性提取液體積（ml）為1：5~10的比例（建議取約0.1g 組織，加入1ml堿性提取液），冰浴研磨，95℃水浴5min（蓋緊，以防止水分散失）；冰浴 中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加入500μl酸性提取液使之中和， 混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 | 3、細胞或細菌中NAD+和NADH的提?。?/span> NAD+的提?。合仁占毎蚣毦诫x心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：酸性 提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml酸性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl堿性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 NADH的提取：先收集細胞或細菌到離心管內(nèi)，棄上清，按照細菌或細胞數(shù)量（104個）：堿 性提取液體積（ml）為500~1000：1的比例（建議500萬細菌或細胞加入1ml堿性提取液）， 超聲波破碎（冰浴，功率20％或200W，超聲3s，間隔10s，重復30次），95℃水浴5min （蓋緊，以防止水分散失）；冰浴中冷卻后，10000g 4 ℃離心10min；取500μl上清液，加 入500μl酸性提取液使之中和，混勻，10000g 4 ℃離心10min，取上清，置冰上待測。 |
ADH測定操作：
1. 分光光度計預熱30 min，調(diào)節(jié)波長到340 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 試劑二在25℃水浴中保溫30 min。
3. 空白管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL蒸餾水、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A1和A2?！鰽空白管=A1-A2。。
4. 測定管：在1mL石英比色皿中依次加入100μL上清液、800μL試劑二和100μL試劑四，迅速混勻后于340nm測定吸光值變化，分別記錄15s和75s時吸光值，分別記為A3和A4?！鰽測定管=A3-A4。
注意：空白管只需測定一次。
環(huán)胍肽(CCP)英文名：CCP ELISA Kit20號染色體開放閱讀框151抗體包裝1g
踝蛋白(TLN)英文名：TLN ELISA Kit20號染色體開放閱讀框78抗體包裝1g
花生四烯-5-脂加氧(ALOX5)英文名：ALOX5 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框187抗體包裝25g
花生四烯-15-脂加氧(ALOX15)英文名：ALOX15 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框59抗體包裝5g
花生四烯-12-脂加氧(ALOX12)英文名：ALOX12 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框152抗體包裝500g
亨廷頓蛋白(HTT)英文名：HTT ELISA Kit20號染色體開放閱讀框165抗體包裝100g
黑瘤細胞黏附分子(MCAM)英文名：MCAM ELISA Kit20號染色體開放閱讀框166抗體包裝25g
黑色瘤抗原家族A1(MAGEA1)英文名：MAGEA1 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框173抗體包裝500g
核因子κB抑制因子α(IκBα)英文名：IκBα ELISA Kit20號染色體開放閱讀框24抗體包裝1g
核因子κB受體激活因子配基(RANκL)英文名：RANκL ELISA Kit20號染色體開放閱讀框30抗體包裝250mg
核因子κB2(NFκB2)英文名：NFκB2 ELISA Kit20號染色體開放閱讀框4抗體包裝1g
核因子κB(NFκB)英文名：NFκB ELISA Kit20號染色體開放閱讀框7抗體包裝1g
核因子I/B(NFIB)英文名：NFIB ELISA Kit20號染色體開放閱讀框79抗體包裝5g
核纖層蛋白A/C(LMNA)英文名：LMNA ELISA Kit20號染色體開放閱讀框94抗體包裝1g
核糖核T2(RNASET2)英文名：RNASET2 ELISA Kit21號染色體開放閱讀框37抗體包裝5g
米根霉Rhizopus│oryzae 質(zhì)量規(guī)格：HPLC>95%,標準品真核延伸因子2試劑盒異補骨脂二氫黃;Isobavachin
ATCC55739資源名稱: 羅伊氏乳桿菌 質(zhì)量規(guī)格：克林霉含量>758μg/mg,USP32真核起始因子4A - II試劑盒異連翹酯苷A;Isoforsythias
香菇18Lentinula│edodes (Berk.) Pegler 質(zhì)量規(guī)格：用于含量測定張力蛋白4試劑盒氧海堿;Oxoglaucine
二胺氧化酶(DAO)測試盒50管/24樣空腸彎曲桿 5--2-(4-苯氧基)-苯組織型纖溶原激活劑Elisa
生活飲用水 鈣、鎂 2-甲基-3-硝基-5-吡啶組織因子Elisa
食物鹽單胞 2-溴-3-氟異組織因子途徑抑制物Elisa
相思根瘤 3-甲酰基-4-甲氧基苯酸組織因子途徑抑制物2Elisa
釀酒酵母 頭孢羅齊門冬酰Elisa
產(chǎn)黃青霉 N-乙?；?5'-O-(4,4-二甲氧基三苯甲基)-2'-O-[(叔丁基)二甲基硅基]胞苷-3'-(肉堿Elisa
細鏈格孢（可訂購） 2,4-二叔戊基亮啡肽Elisa
產(chǎn)二鏈霉 三羰基(η-環(huán)戊二烯基)合錳二聚體甲啡肽Elisa
托木爾假單胞 5--1,3-二氟-2-苯DepakineElisa
枯草芽胞桿 1-Boc-2-甲基哌TegratolElisa
泛屬 對二乙酰氧基苯TRHRElisa
鷲峰假絲酵母 二二乙二酯BCAS4Elisa
派倫霉屬 五氟生物酯緊密連接蛋白5Elisa
天藍色鏈霉 6-乙氧基-2-巰基苯并噻唑糖化白蛋白Elisa
產(chǎn)朊假絲酵母 二苯甲酰對醌二肟Midline人1蛋白Elisa
注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器 。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。
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