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人真皮成纖維細(xì)胞

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參考價(jià)7010
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
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    生產(chǎn)商
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    上海市

規(guī)格
5×10^57010元15 瓶 可售
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更新時(shí)間:2024-01-31 09:54:19瀏覽次數(shù):363

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
貨號(hào) A01X1400 主要用途 僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
組織來(lái)源 皮膚組織 種屬來(lái)源
生長(zhǎng)特性 貼壁 細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
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詳細(xì)介紹

原代細(xì)胞培養(yǎng):

原代細(xì)胞(Primary cells):是指直接從機(jī)體取出的組織或細(xì)胞獲得單個(gè)細(xì)胞并在體外進(jìn)行培養(yǎng)的細(xì)胞。這里的組織主要指:組織器官、外周血及胚胎等。

原代細(xì)胞培養(yǎng):由于原代細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,繁殖一定的代數(shù)停止生長(zhǎng)(一般10代以內(nèi))。所以一般認(rèn)為:培養(yǎng)的原代的第1和傳代到第10代以內(nèi)的細(xì)胞統(tǒng)稱為原代細(xì)胞培養(yǎng)。

公司產(chǎn)品僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

一、細(xì)胞基本屬性

細(xì)胞名稱

人真皮成纖維細(xì)胞

組織來(lái)源

皮膚組織

商品貨號(hào)

A01X1400

種屬來(lái)源

產(chǎn)品規(guī)格

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介

人真皮成纖維細(xì)胞分離自皮膚組織內(nèi)的真皮層;皮膚組織來(lái)源包括頭部、臉部、手、腳、腿、背部、腹部、包皮等體表部位皮膚,可依據(jù)需求選用;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結(jié)締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質(zhì)內(nèi)。其內(nèi)分布著各種結(jié)締組織細(xì)胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結(jié)構(gòu)組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質(zhì)。成纖維細(xì)胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng),在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁,其中部分開(kāi)始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細(xì)胞基本貼壁wan全,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長(zhǎng),不聚集成團(tuán);細(xì)胞生長(zhǎng)迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長(zhǎng),平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細(xì)胞在生理?xiàng)l件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時(shí)大量聚集修復(fù)損傷組織。

包被條件


培養(yǎng)基

FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率

2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性

貼壁

細(xì)胞形態(tài)

成纖維細(xì)胞樣

傳代特性

可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)良好

消化液

0.25%胰蛋bai酶

培養(yǎng)條件

氣相:空氣,95%;CO2,5%

8.jpg

6.jpg



具體步驟:

1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無(wú)菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;

2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;

3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);

4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定,約1-2h;

5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí),用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞,收集;

6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
注意事項(xiàng):

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和技術(shù)部溝通。

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