詳細(xì)介紹
產(chǎn)品分類:植物染色
儲存條件:室溫,避光,12個月
用途:花粉染色
注意事項(xiàng):又稱Alexanderran染色液,由乙醇、孔雀綠、甘油、三氯乙醛、酸性品紅、橘黃G等組成。
公司產(chǎn)品僅用于科研具有質(zhì)量可靠、效果穩(wěn)定、靈敏度高、操作簡單、易保存等特點(diǎn),咨詢并訂購!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 貨號 |
亞歷山大染色液 | 10ml | FS-R7089 |
配制與標(biāo)定的實(shí)驗(yàn)原理:
1、用EDTA二鈉鹽配制EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的原因;
EDTA是四元酸,是一種白色晶體粉末,常用H4Y表示,溶解度很小,室溫溶解度為0.02g/100g H2O。
2、標(biāo)定EDTA標(biāo)準(zhǔn)溶液的工作基準(zhǔn)試劑,基準(zhǔn)試劑的預(yù)處理:稱量前一般應(yīng)先用稀鹽酸洗去氧化層,然后用水洗凈,烘干。
配制步驟:
1、取適量鋅片放在100mL燒杯中,用0.1mol·L-1 HCl溶液(自配)清洗1min,再用自來水、純水洗凈,烘干、冷卻。
2、用直接稱量法在干燥小燒杯中準(zhǔn)確稱取0.15~0.2g Zn,蓋好小表面皿。
3、用滴管從燒杯口加入5mL 1:1 鹽酸,待Zn溶解后吹洗表面皿、杯壁,小心地將溶液轉(zhuǎn)移至250mL容量瓶中,用純水稀釋至標(biāo)線,搖勻。
實(shí)驗(yàn)方法與判定:
1.對照品溶液的穩(wěn)定性
2.對照品溶液的配制:精密量取腦對照品適量,加無水乙醇制成每1ml含腦1mg的溶液,作為對照品溶液。
3.色譜條件:以交聯(lián)鍵合聚乙二醇為固定相的毛細(xì)管柱;柱溫120℃;進(jìn)樣口溫度250℃;檢測器溫度250℃;分流進(jìn)樣,分流比10:1。理論塔板數(shù)按腦計(jì)算應(yīng)不低于10000。
4.實(shí)驗(yàn)方法:配制的對照品溶液,一份置冷處保存,一份置室溫中保存,在第1、3、7、10、15天重新配制一份對照品溶液,三種儲備液同時稀釋制成每1ml中約含50ug的溶液。照氣相色譜法,并依據(jù)新對照品的峰面積計(jì)算原對照品溶液的含量。記錄下來,保證原對照品溶液含量在考察期相對平均偏差不超過2.0%,驗(yàn)證對照品溶液在使用期內(nèi)穩(wěn)定可靠。
使用方法:
1. 常用篩選濃度
注意:用來篩選穩(wěn)轉(zhuǎn)株的工作濃度需要根據(jù)細(xì)胞類型,培養(yǎng)基,生長條件和細(xì)胞代謝率而變化,推薦使用濃度為50-1000μg/mL。對于第一次使用的實(shí)驗(yàn)體系建議通過建立殺滅曲線(kill curve),即劑量反應(yīng)性曲線,來確定最佳篩選濃度。
一般而言,哺乳動物細(xì)胞50-500μg/mL;細(xì)菌/植物細(xì)胞20-200μg/mL;真菌300-1000μg/mL。
2. 殺滅曲線的建立
注意:為了篩選得到穩(wěn)定表達(dá)目的蛋白的細(xì)胞株,需要確定能夠殺死未轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞的抗生素濃度,可通過建立殺滅曲線(劑量反應(yīng)曲線)來實(shí)現(xiàn),至少選擇5個濃度。
1) 第一天:未轉(zhuǎn)化的細(xì)胞按照20-25%的細(xì)胞密度鋪在合適的培養(yǎng)板上,37℃,CO2培養(yǎng)過夜;注:對于需要更高密度來檢測活力的細(xì)胞,可增加接種量。
2) 根據(jù)細(xì)胞類型,設(shè)定合適范圍內(nèi)的濃度梯度。以哺乳動物細(xì)胞為例,可設(shè)定50,100,250,500,750,1000μg/mL。先用去離子水或者PBS buffer按照1:10的比例將母液稀釋到5 mg/ml,然后按照下表稀釋到相應(yīng)濃度的工作液。
3) 第二天:替換舊的培養(yǎng)基,換用新鮮配制的含有相應(yīng)濃度藥物的培養(yǎng)基。每個濃度做三個平行孔。
4) 接下來每3-4天更換新的含藥物培養(yǎng)基。
5) 按照固定的周期(如每2天)進(jìn)行活細(xì)胞計(jì)數(shù)來確定阻止未轉(zhuǎn)染細(xì)胞生長的恰當(dāng)濃度。選擇在理想的天數(shù)(通常是7-10天)內(nèi)能夠殺死絕大多數(shù)細(xì)胞的濃度為穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞篩選用的工作濃度。
3. 穩(wěn)定轉(zhuǎn)染細(xì)胞的篩選
1) 轉(zhuǎn)染48h后,用含有適當(dāng)濃度的潮霉素B篩選培養(yǎng)基來傳代細(xì)胞(直接傳代或者稀釋后傳代)。
注意:細(xì)胞處于活躍分裂狀態(tài)時抗生素的殺傷。則當(dāng)細(xì)胞過于稠密,其效率會降低。為了得到較好的篩選效果,最好將細(xì)胞稀釋至豐度不超過25%
2) 每隔3-4天更換含有藥物的篩選培養(yǎng)液。
3) 篩選7天后觀察并評估細(xì)胞克?。洌┑男纬汕闆r。集落的形成可能還需要一周或者更多的時間,這取決于宿主細(xì)胞類型,轉(zhuǎn)染,以及篩選效果。
4) 挑取并轉(zhuǎn)移5-10個抗性克隆于35mm細(xì)胞培養(yǎng)板,繼續(xù)用含藥物的篩選培養(yǎng)液維持培養(yǎng)7天。
5) 之后更換正常培養(yǎng)基培養(yǎng)即可。
鏈格孢菌CD3抗體Human MT-CO1(Cytochrome c oxidase subunit 1) ELISA Kit人抗染色體抗體(anti-chromosome Ab)免疫試劑盒
枯草芽孢桿菌CP2相關(guān)轉(zhuǎn)錄抑制因子1抗體Human LAMB1(Laminin subunit beta-1) ELISA Kit人抗縮(ALD)自身抗體免疫試劑盒
膠孢電壓依賴型N型鈣通道α1B抗體Human FBN2(Fibrillin-2) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗體(IgM)免疫試劑盒
科貝特氏菌屬煙堿型乙酰受體A2(神經(jīng)型)抗體Human TGFBR1(TGF-beta receptor type-1) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗體(IgG) 免疫試劑盒
魯氏毛霉C型凝集結(jié)構(gòu)域家族1成員A抗體Human PRKCE(Protein kinase C epsilon type) ELISA Kit人抗鞘磷脂抗體(IgA)免疫試劑盒
蜂房類芽孢桿菌γ干擾誘導(dǎo)單核因子抗體Human PRKCG(Protein kinase C gamma type) ELISA Kit人抗浦肯野抗體/抗Yo抗體(PCA-1/Yo)免疫試劑盒
牛邊緣無漿體(德株)血小板因子4抗體Human NRGN(Neurogranin) ELISA Kit人抗平滑肌抗體(ASMA)免疫試劑盒
球孢白僵菌血小板趨化因子7蛋白抗體Human IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) ELISA Kit人抗皮膚抗體(ASA)免疫試劑盒
缺陷短波單胞菌干擾誘導(dǎo)T趨化因子抗體Human IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) ELISA Kit人抗旁瘤抗原Ma2(PNMA2)抗體免疫試劑盒
金針菇B-淋巴趨化因子抗體Human DSG3(Desmoglein-3) ELISA Kit人抗凝脂(PL)抗體(IgM)免疫試劑盒
黑腐病黃色單胞菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白12抗體Human NOX1(NADPH oxidase 1) ELISA Kit人抗凝脂(PL)抗體(IgG)免疫試劑盒
冷水金黃桿菌凋亡加強(qiáng)結(jié)構(gòu)域蛋白14抗體Human LAD1(Ladinin-1) ELISA Kit人抗凝血抗體(aPT1/aPT2)免疫試劑盒
黑曲霉肌激M型抗體Human ITGA5(Integrin alpha-5) ELISA Kit人抗凝血-磷脂酰絲復(fù)合物(RTH-PS)抗體免疫試劑盒
擬盤多毛孢屬NK受體BY55抗體Human XBP1(X-box-binding protein 1) ELISA Kit人抗凝血III(AT III)免疫試劑盒
紅菇CD229抗體Human DKK2(Dickkopf-related protein 2) ELISA Kit人抗凝血Ⅲ抗體免疫試劑盒
Pseudomonas guariconensis 凝集胎盤蛋白1抗體Human C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) ELISA Kit人抗釀酒酵母抗體(IgG)免疫試劑盒
: K48/39資源名稱: 阿麥斯福特沙門氏菌 質(zhì)量規(guī)格:AR20S蛋白體試劑盒9’’’-丹B單酯
葉氏假交替單胞菌Pseudoalteromonas│elyakovii 質(zhì)量規(guī)格:ACS2,3-二磷甘油試劑盒9’-丹B單酯
熱土厭氧棒菌Anaerobaculum│thermoterrenum 質(zhì)量規(guī)格:指示劑級2,3Dinor血栓烷B2試劑盒丹B二酯
亞歷山大染色液PKB(Human protein kinase B) ELISA Kit 人蛋白激meiB規(guī)格: 48T
HO-2(Human heme oxygenase 2) ELISA Kit 人血紅su氧合mei2規(guī)格: 48T
M2-PK (Human Pyruvate Kinase) ELISA Kit 人丙tongsuan激meiM2型同工mei規(guī)格: 48T
TPO(Human Thyroid-Peroxidase) ELISA Kit 人jia狀腺過氧化物mei規(guī)格: 48T
AFU(Human alpha-L-fucosidase) ELISA Kit 人αL巖藻糖mei規(guī)格: 48T