振動圓二色光譜儀的原理是通過測量分子對圓偏振光的吸收情況來研究其結(jié)構(gòu)特性。具體來說,光源發(fā)出的線性偏振光被分解為左旋和右旋圓偏振光,經(jīng)過樣品時,由于手性分子對不同偏振方向的吸收有所差異,導(dǎo)致光的吸收強度發(fā)生變化。這種吸收差異即為圓二色信號,通常用以分析分子的二級結(jié)構(gòu)、分子折疊過程以及相互作用等。
振動圓二色光譜儀的測定步驟:
-根據(jù)研究目的選擇相應(yīng)的溶劑,將待測的有機化合物溶解于其中,注意控制濃度。
-確保樣品中沒有雜質(zhì)或者其他干擾物。
-啟動,并按照廠家的指示預(yù)熱儀器至需求溫度。通常情況下,建議將儀器預(yù)熱至室溫。
-在樣品池中加入相同溶劑但不含有機化合物的空白樣品。
-按照儀器操作手冊的指示,進行空白校準,以消除系統(tǒng)本底的影響。
-選擇合適的參考物質(zhì)(如D-葡萄糖酸鈉),將其溶解于相同溶劑中,加入樣品池。
-按照儀器操作手冊的指示進行參考物質(zhì)校準。
-根據(jù)樣品的性質(zhì)和研究目的,設(shè)置合適的操作參數(shù),如波長范圍、光強等。
-將待測樣品溶液加入樣品池中,確保樣品池的表面平整且沒有氣泡。
-將樣品池放入樣品室中。
-按下開始測量按鈕,儀器會自動記錄樣品的圓二色信號。
-在測量過程中,避免干擾,保持實驗室環(huán)境的穩(wěn)定。
-將測量得到的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)出為適當?shù)母袷健?br />
-根據(jù)儀器的響應(yīng)性能,對數(shù)據(jù)進行校正,消除背景噪聲等。
-根據(jù)所研究的問題和已有知識,對數(shù)據(jù)進行合理的分析。
-根據(jù)數(shù)據(jù)分析結(jié)果,對樣品的結(jié)構(gòu)和構(gòu)象進行解讀和討論,得出研究結(jié)論。