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大鼠白介素ELISA試劑盒操作注意事項

個人防護

• 手套和防護：試劑盒中的終止液是酸性的，操作時請記得戴手套，避免接觸皮膚和眼睛。如果不小心接觸到，立即用大量清水沖洗。

試劑保存

• 溫度控制：試劑盒要放在2~8℃的冰箱里保存，并在有效期內(nèi)使用。

• 標(biāo)準(zhǔn)品保存：用不完的標(biāo)準(zhǔn)品，要么丟掉，要么分裝后放在-20～-80℃的冰箱里。

試劑回溫

• 室溫恢復(fù)：使用前，讓試劑在室溫下恢復(fù)30分鐘，并確保所有成分和樣品都充分混勻。

避免污染

• 一次性用品：實驗中使用一次性EP管、槍頭、封板膜和干凈的塑料容器，以避免交叉污染。

操作一致性

• 標(biāo)準(zhǔn)操作：實驗中，對標(biāo)準(zhǔn)品和樣本進行復(fù)孔檢測，并保持試劑加入順序一致。每次檢測都需要做標(biāo)準(zhǔn)曲線。

洗滌清楚

• 全部清洗：洗板時去除殘留液體，以獲得最佳結(jié)果。洗完后立即進行下一步，不要讓微孔板干掉。

避免氣泡

• 輕柔混勻：在重溶或混勻標(biāo)準(zhǔn)品時，要輕柔操作，避免產(chǎn)生氣泡。

顯色和終止

• 顯色底物：顯色底物添加前應(yīng)無色，并避光保存。

• 終止液順序：終止液的添加順序應(yīng)與顯色底物相同。添加后，底物顏色應(yīng)從藍變黃。

樣本處理

• 去除沉淀：去除樣本中可見的沉淀，避免使用溶血或高血脂樣本，以免影響結(jié)果。

樣本稀釋

• 稀釋檢測：如果樣本中靶標(biāo)物濃度過高，需要適當(dāng)稀釋后再檢測。正式實驗前，先做預(yù)實驗確定稀釋倍數(shù)。

遵循這些注意事項，可以確保ELISA實驗的準(zhǔn)確性和可靠性。

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樣本稀釋小貼士

為什么要稀釋樣本？

• 如果樣本中目標(biāo)物質(zhì)的濃度太高，超過了測試范圍，就需要稀釋，以便準(zhǔn)確測量。

稀釋到什么程度？

• 稀釋后，樣本信號應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線中間范圍內(nèi)，以確保數(shù)據(jù)準(zhǔn)確。

稀釋的小技巧

• 大倍數(shù)稀釋時，建議分步進行，比如先稀釋10倍，再從這個基礎(chǔ)上稀釋20倍，得到準(zhǔn)確的200倍稀釋液。

取多少樣本？

• 取樣時，至少5微升，以減少操作誤差。

預(yù)實驗很重要

• 正式實驗前，先做小實驗，確定樣本需要稀釋的倍數(shù)。

稀釋操作要規(guī)范

• 特別是大倍數(shù)稀釋時，要規(guī)范操作，減少誤差。

稀釋后的樣本怎么保存？

• 稀釋后的樣本要妥善保存，避免反復(fù)凍融，防止蛋白質(zhì)降解。建議分裝后放在-20℃或-70℃的冰箱里。

樣本預(yù)處理

• 不同類型的樣本需要不同的預(yù)處理方法，合適的預(yù)處理是確保實驗準(zhǔn)確的關(guān)鍵。

稀釋液的選擇

• 稀釋樣本時，最好用和標(biāo)準(zhǔn)品一樣的稀釋液，以保持實驗條件一致。

希望這些小貼士能幫助你順利完成ELISA實驗，獲得準(zhǔn)確結(jié)果。