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ELISA檢測試劑盒原理和局限性分析
閱讀:1242 發(fā)布時間:2013-8-5ELISA檢測試劑盒原理和局限性
ELISA檢測試劑盒原理
酶聯(lián)免疫吸附測定法定量測定三聚氰胺殘留。將標準、樣品提取物和三聚氰胺酶標記物添加到現(xiàn)已包被有三聚氰胺抗體的微孔中開始反應。在30分鐘的培養(yǎng)過程中,樣品萃取物中的三聚氰胺與三聚氰胺酶標記物競爭結合微孔中的三聚氰胺抗體,培養(yǎng)30分鐘后洗掉微孔中所有沒有結合的三聚氰胺及三聚氰胺酶標記物。在用稀釋的洗液清潔完畢后,每孔中添加清澈的底物溶液,結合的酶標記物將無色的底物轉化為藍色的物質。培養(yǎng)20分鐘后中止此反應,根據(jù)各孔色彩深淺進行數(shù)據(jù)讀取。根據(jù)標準的色彩得出樣品中三聚氰胺的的濃度值。
ELISA檢測試劑盒局限性
ELISA檢測試劑盒的發(fā)現(xiàn)
我們現(xiàn)已對能夠呈現(xiàn)在檢測樣品中的許多有機和無機物做了檢測,發(fā)現(xiàn)它們不與這個試劑盒產(chǎn)生交叉反應。然而在樣品中也含有一些容易變質的化合物,它們通過基質影響來攪擾測定,如含脂肪的食物,它們在測定前要經(jīng)過稀釋來消除一些基質對實驗結果的影響。在運用的過程中呈現(xiàn)失誤也會影響成果,例如試劑盒存儲的條件、汲取液體的程序、汲取液體的不、在產(chǎn)生免疫和底物反應的過程中培養(yǎng)時間不。