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活體細胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測

閱讀:1571          發(fā)布時間:2015-4-16
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主要用途


 活體細胞線粒體膜通道孔(MPTP)紅色熒光(TMRM)檢測試劑是一種旨在通過四甲基羅丹明染料,選擇性地聚集在線粒體內(nèi)呈現(xiàn)熒光染色,一旦釋放到細胞漿,即刻發(fā)生熒光淬滅,來分析和觀察線粒體膜通道孔活性的而經(jīng)典的技術方法。該技術經(jīng)過精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種活體細胞線粒體(動物、人體、昆蟲等)膜通道孔活性(開放狀態(tài))的檢測。產(chǎn)品嚴格無菌,即到即用,活體檢測,分辨率高,操作簡捷,性能穩(wěn)定。


技術背景


線粒體膜通道孔(mitochondrial permeability transition pore;MPTP)是由線粒體內(nèi)外膜成分構成的非特異性且鈣離子依賴性通道。在細胞凋亡或壞死時,線粒體內(nèi)容物通過膜通道孔釋放到胞漿中。線粒體膜電位的去極化(depolarization),導致膜通道孔的開放,顯著改變線粒體的通透性,使之線粒體膨脹(swelling),內(nèi)容物釋放。其中鈣離子過度進入、線粒體谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等導致膜通道孔的持續(xù)開放,而造成細胞色素C的釋放和線粒體膜電位的消失。四甲基羅丹明(tetramethylrhodamine methyl ester;TMRM),為羅丹明衍生物陽離子染料,作為電勢測定(potentiometric)熒光探針:*,具有親脂性的; 第二,與線粒體內(nèi)負電極結合而聚集;第三,容易進入細胞及其線粒體。四甲基羅丹明進入細胞后,被細胞內(nèi)酯酶切離,產(chǎn)生四甲基羅丹明四甲基羅丹明進入線粒體后,被線粒體俘獲,呈現(xiàn)強烈熒光。一旦線粒體膜通道孔開放,四甲基羅丹明釋放出來而在胞漿重新分布,其熒光性顯著降低。線粒體內(nèi)熒光的變化,表明膜通道孔的開放狀態(tài)。

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