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冰凍切片基質金屬蛋白酶原位明膠酶譜法熒光染色試劑盒產品說明書
閱讀：1831 發(fā)布時間：2015-5-28| 提 供 商 | 上海哈靈生物科技有限公司 | 資料大小 | 208.3KB |
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主要用途
冰凍切片基質金屬蛋白酶（MMP）原位明膠酶譜法（in situ zymography）熒光染色試劑是一種旨在通過異硫氰酸熒光素標記的明膠作為底物，針對未固定處理的冰凍切片予以染色處理，基質金屬蛋白酶切離底物產生高度綠色熒光，來定位組織中的基質金屬蛋白酶活性的而經典的技術方法。該技術由大師級科學家精心研制、成功實驗證明的。其適用于各種冰凍動物組織的基質金屬蛋白酶-2和9的分析。產品即到即用，性能穩(wěn)定，操作便捷，敏感度高，熒光清晰，重復性好。
技術背景
基質金屬蛋白酶（Matrix metalloproteinases；MMPs）是一類結構高度同源的分泌型或膜相關性鋅內肽酶的總稱，因含有金屬（鋅、鈣）離子而得名。迄今為止發(fā)現的MMPs至少有28種，幾乎能降解除多糖以外的全部細胞外基質（extracellular matrix）成分，同時參與胚胎發(fā)育、形態(tài)形成、胚泡植入（blastocyst）、血管形成、組織再吸收（tissue resorption）、疾病發(fā)生，例如關節(jié)炎、癌細胞浸入轉移等。根據降解的底物不同可將MMPs分為4大類：（1）膠原酶：MMP1、MMP8、MMP13主要消化Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和蛋白多糖；（2）明膠酶（Ⅳ型膠原酶）：MMP2、MMP9，又稱明膠酶A、B，主要消化Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅹ型膠原和彈性纖維；（3）基質溶解素：MMP3、MMP7、MMP16、MMP11，主要作用于纖維粘連蛋白、層粘連蛋白、彈力纖維、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ膠原及MMP1、MMP8、MMP9；（4）膜型金屬蛋白酶：MT1-MMP、MT2-MMP、MT3-MMP，主要作用于明膠、Ⅳ型膠原、MMP2。體內絕大多數細胞并不儲備MMPs，當需要MMPs的信號傳遞到細胞后才臨時合成，合成的MMPs以無活性的酶原（proenzyme）形式分泌到細胞外，隨后被多種蛋白酶和非蛋白酶水解以及熱處理激活，一種激活的MMPs可激活另一種MMPs，形成瀑布效應。原位明膠酶譜法熒光染色（in-situ fluorescence zymography）技術在于提高基質金屬蛋白酶檢測的敏感性，使用異硫氰酸熒光素（FITC）標記的明膠作為底物，經過基質金屬蛋白酶水解后產生熒光多肽，據此在熒光顯微鏡下檢測酶的活性和位置。