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ELISA實(shí)驗(yàn)常用的規(guī)則是什么?

 

         ELISA是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。它是以免疫學(xué)反應(yīng)為基礎(chǔ)，將抗原、抗體的特異性反應(yīng)與酶對(duì)底物的催化作用相結(jié)合起來(lái)的一種敏感性很高的實(shí)驗(yàn)技術(shù)。以下是對(duì)ELISA實(shí)驗(yàn)的通用步驟的簡(jiǎn)單說(shuō)明。

ELISA實(shí)驗(yàn)通用步驟：

（1）、要保證移液槍的性，偏差不能超過(guò)2%?？捎盟碗娮犹炱竭M(jìn)行判定。如果有專業(yè)人員進(jìn)行糾正更好。
（2）、要配備20ul、50ul、100ul、1000ul和排槍各一支。提取不一樣的液體后，要更換槍頭。即使是提取標(biāo)準(zhǔn)品時(shí)也一樣。
要在實(shí)驗(yàn)前1小時(shí)將試劑盒從冰箱中取出，使各種試劑都恢復(fù)到室溫，以使效果更安穩(wěn)。
（3）、實(shí)驗(yàn)時(shí)，要使底物避光儲(chǔ)存。
（4）、用槍提取液體時(shí)速度不能太快，避免生成氣泡而使提取量不。
（5）、提取液體時(shí)，要用量程和需要量相近的槍去吸，減小偏差數(shù)值。
（6）、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。
（7）、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕搖晃30秒，是液體緩和均勻。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功用。
（8）、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，避免水分的蒸發(fā)。
（9）、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加*。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
（10）、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行制作PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)時(shí)間保存。
（11）、底物是光敏感的，需要在臨用前現(xiàn)配。
（12）、檢測(cè)前，要翻開(kāi)酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。
（13）、底物有一定的毒性，中止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。
（14）、待檢樣品要澄清，否則會(huì)影響效果的性。
（15）、溫浴時(shí)間應(yīng)遵循試劑盒規(guī)定。
（16）、應(yīng)盡量做雙孔實(shí)驗(yàn)，這樣才華保證數(shù)據(jù)的性。
（17）、對(duì)效果有疑問(wèn)的樣品要用其它方法進(jìn)行確證。