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- 36244ES30 產(chǎn)品型號
- Yeasen/翌圣生物 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 上海市 所在地
訪問次數(shù):680更新時間:2022-02-10 14:09:59
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Protein Silver Stain Kit蛋白質(zhì)銀染試劑盒
產(chǎn)品信息
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號 | 規(guī)格 | 儲存 | 價格(元) |
Protein Silver Stain Kit蛋白質(zhì)銀染試劑盒 | 36244ES30 | 30 T | 4℃避光保存 | 683.00 |
產(chǎn)品描述
生化實(shí)驗(yàn)中蛋白質(zhì)通過凝膠電泳的方式分離后需經(jīng)過染色才能肉眼可見,染色方法有兩種:1)染料染色法;2)金屬染色法。前者主要是考馬斯亮藍(lán)染色法,后者主要采用銀染法。前者操作比較簡單、省時,但是后者具有較高的檢測靈敏性,可檢測到10-100 ng蛋白質(zhì),比考馬斯亮藍(lán)染色法靈敏100多倍。
本試劑盒采用銀染的方法,用于檢測聚丙烯酰胺凝膠和瓊脂糖凝膠中的微量蛋白質(zhì)。
產(chǎn)品組分
編號 | 組分 | 規(guī)格 |
36244ES30 (30T) | ||
36244-A | 增敏液(100×) | 1×30 mL |
36244-B | 銀染液(100×) | 1×30 mL |
36244-C | 顯色液A | 1.5 mL |
36244-D | 顯色液B(5×) | 5×120 mL |
運(yùn)輸和保存方法
冰袋運(yùn)輸。4℃保存,1年有效。銀溶液、顯色液A需避光保存。
注意事項(xiàng)
1)需自備乙醇和冰乙酸(分析純)
2)顯色過程較快,要注意把握時間,避免染色過度。
3)所用器皿要很潔凈,不要用手直接接觸,以免雜蛋白污染。
4)使用說明中的使用次數(shù)及各種溶液的使用量適用于大小為8×10 cm厚度為0.75-1 mm的凝膠。對于更大的凝膠,各種溶液的使用量需按凝膠面積的比例放大,對于更厚的凝膠,作用時間需按照厚度的比例適當(dāng)延長。
5)清洗用水盡量用高純度去離子水如dd H2O,可以減少背景著色。
6)本試劑盒也可以用于2D凝膠的銀染,并且染色后和后續(xù)的質(zhì)譜檢測兼容。
7)使用本試劑盒只需 90 分鐘即可完成銀染實(shí)驗(yàn)。
8)為了您的安全和健康,請穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1.試劑配制
1)固定液的配制(自備): 加入50 mL乙醇、10 mL冰乙酸和40 mL去離子水,混勻。
2)30%乙醇的配制(自備):70 mL去離子水中加入30 mL乙醇,混勻。
3)增敏液(1×)的配制:99 mL去離子水中加入1 mL增敏液(100×),混勻。增敏液(1×)配制后需在2 h內(nèi)使用。
4)銀染液(1×)的配制:99 mL去離子水中加入1 mL銀染液(100×),混勻。銀染液(1×)配制后需在2 h內(nèi)使用。
5)顯色液的配制:80 mL 去離子水中加入20 mL顯色液B(5×),再加入0.05 mL顯色液A,混勻后即為顯色液。顯色液配制后需在20分鐘內(nèi)使用。
6)終止液的配制(自備):95 mL去離子水中加入5 mL 冰乙酸,混勻。
2.使用方法
以10 cm2凝膠為例,不同凝膠大小可按比例調(diào)整增敏液、銀染液和終止液的體積。
1)固定:電泳結(jié)束后,取凝膠放入約100 mL固定液中,在搖床上室溫?fù)u動20分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
2)洗滌:棄固定液,加入100 mL 30%乙醇,在搖床上室溫?fù)u動10 min,搖動速度為60-70 rpm。棄30%乙醇,加入200 mL去離子水,在搖床上室溫?fù)u動10分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
3)增敏:棄水,加入100 mL增敏液(1×),在搖床上室溫?fù)u動2分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
4)洗滌:棄原有溶液,加入200 mL去離子水,在搖床上室溫?fù)u動1min×2,搖動速度為60-70 rpm。
5)銀染:棄水,加入100 mL銀染液(1×),在搖床上室溫?fù)u動20分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
6)洗滌:棄原有溶液,加入100 mL 去離子水,在搖床上室溫?fù)u動0.5 min×2,搖動速度為60-70 rpm。
7)顯色: 棄水,加入100 mL顯色液,在搖床上室溫?fù)u動3-10分鐘,直至出現(xiàn)比較理想的預(yù)期蛋白條帶,搖動速度為60-70 rpm。
8)終止:棄顯色液,加入100 mL終止液,在搖床上室溫?fù)u動10分鐘,搖動速度為60-70 rpm。
9)洗滌:棄原有溶液,加入100 mL 去離子水,在搖床上室溫?fù)u動0.5 min×2,搖動速度為60-70 rpm。
10)保存顯色出的蛋白質(zhì)條帶并記錄。
HB191126