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酶標(biāo)儀在激素六項(xiàng)檢測(cè)中的應(yīng)用

閱讀:2634      發(fā)布時(shí)間:2017-7-26
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激素六項(xiàng)主要包括(促黃體生成素LH、泌乳素PRL、睪酮Testosterone、卵泡刺激素FSH、雌二醇Estradio、孕酮Progesterone)主要通過ELISA方法來檢測(cè),酶標(biāo)儀檢測(cè)激素六項(xiàng)的實(shí)驗(yàn)原理如下:

應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人雌二醇(E2)水平。用純化的人雌二醇(E2)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入雌二醇(E2),再與HRP標(biāo)記的雌二醇(E2)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的雌二醇(E2)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人雌二醇(E2)濃度。

有些試劑盒廠家如果要求雙波長(zhǎng)檢測(cè),那一般用的就是酶標(biāo)儀450nm波長(zhǎng)和酶標(biāo)儀630nm波長(zhǎng)來進(jìn)行雙波長(zhǎng)檢測(cè)。

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