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關(guān)鍵詞:獨腳金內(nèi)酯
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品牌名稱:
測序?qū)嶒灹鞒蹋?br/>生存期
在細胞一代中,細胞能倍增3~6次,經(jīng)歷三個階段:
1. 潛伏期(latent phase) :
接種 經(jīng)過 懸浮期(細胞質(zhì)回縮,胞體呈圓球形) 貼壁。
初代培養(yǎng)細胞 經(jīng)過 10~24小時或更多時間。
連續(xù)細胞系和癌細胞系 經(jīng)過 10~30分鐘 貼附。
貼附現(xiàn)象是一個非常復(fù)雜和受多種因素的影響。
影響細胞貼附:底物表面不干凈,影響細胞貼附。
利于細胞貼附:底物表面帶有陽性物質(zhì)與特殊物質(zhì):
纖粘連蛋白(fibronectin FN)、
細胞表面蛋白(cell surface proteinCSP)
這些物質(zhì)有的存在與細胞表面,有的來自血清。
潛伏期特點:
長短與細胞接種密度、種類、使用的培養(yǎng)基性質(zhì)有關(guān)。
(1)細胞貼附后進入潛伏期,細胞無增殖。少見分裂相,細胞有運動活動。
(2)初代培養(yǎng) 細胞潛伏期約為24~96小時或更長,
連續(xù)細胞系和腫瘤細胞潛伏期約6~24小時。
(3)細胞接種密度大潛伏期短。
(4)細胞出現(xiàn)分裂相增多時,標(biāo)志細胞進入指數(shù)增生期。
實驗用品
1. 種類︰
1.1. 細胞培養(yǎng)實驗用品均為無菌,除了玻璃容器與pasteur pipet 外,其它均為塑料無菌
制品。
1.2. TC 級培養(yǎng)盤表面均有coating 高分子物質(zhì)以讓細胞吸附,培養(yǎng)容器種類有Tflask,
plates, dishes, roller bottle 等,依實驗需要使用。
1.3. plastic sterile pipet: 1 ml, 2 ml,5 ml, 10 ml, 25 ml
1.4. 塑料離心管: 15 ml, 50 ml,均有2 種不同材質(zhì),其中polypropylene (PP) 為不透
明材質(zhì),polystyrene (PS) 為透明材質(zhì),可依實驗需要而選擇適合材質(zhì)之離心管。
1.5. glass pastuer pipet: 9 inch,用以抽掉廢棄培養(yǎng)液等。
1.6. 玻璃血清瓶(Pyrex or Duran glassware):100 ml, 250 ml,500 ml,1000 ml
2. 清洗︰
2.1. 新購玻璃血清瓶先以0.1~0.05 N HCl 浸泡數(shù)小時,洗凈后才開始使用。
2.2. 用過之玻璃血清瓶,以高壓蒸汽滅菌,洗凈后分別用一次與二次去離子水沖洗干
凈,勿加清潔劑清洗。
3. 滅菌︰
3.1. 實驗用玻璃血清瓶以鋁箔紙包覆瓶蓋,高壓蒸汽滅菌121 oC, 15 lb, 20 分鐘,置于
oven 中烘干。
3.2. 實驗用玻璃pasteur pipet 以干熱滅菌170 oC, 4 小時。
3.3. 液體或是固體廢棄物可用10 % hypochloride 溶液(次氯酸,即漂白水) 或是蒸汽高
壓滅菌121 oC, 15 lb, 20 分鐘處理。