伊紅染色液(水溶,5%)
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
伊紅(Eosin)又稱曙紅，屬人工合成染料中的呫噸類染料，為桃紅色或粉紅色的粉末。 分子式為 C20H6O5Br4Na2，分子量為 691.86。伊紅適宜于蘇木精配合染色以顯示正?；虿±?/span>組織的形態(tài)結(jié)構(gòu)。水溶性伊紅 Y 含有一個(gè)醌型苯環(huán)的發(fā)色團(tuán)和兩個(gè)形成鈉鹽的酸性助色團(tuán)(R-COONa、R-ONa)。這種形成鹽類的酸性染料在水中溶解時(shí)解離為帶負(fù)電荷的色酸部分(R-COO 、R-O )，即染料的有色部分和帶正電荷的鈉離子部分(Na+)。染色時(shí)伊紅 Y 帶負(fù)電荷的色- 酸部分-不組織內(nèi)帶正電荷的物質(zhì)以離子鍵的形式結(jié)合而顯色。
伊紅染色液(Eosin Y Stain)采用*防腐劑，操作簡(jiǎn)單，不使用汞、甲醇等有毒試劑，可以用于組織切片或培養(yǎng)細(xì)胞的染色。可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在伊紅染色后進(jìn)行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進(jìn)行伊紅復(fù)染。本染色液可以重復(fù)使用，直至認(rèn)為效果不佳時(shí)再換用新的染色液，染色后細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
產(chǎn)品組成：Eosin Y Stain(5%) 100ml 500ml RT 避 光
自備材料：
1、蒸餾水
2、4%多聚甲醛
3、系列乙醇
操作步驟(僅供參考)：
根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求操作，如果用于普通染色應(yīng)稀釋后，參考如下步驟：
1、樣品處理
a) 對(duì)于石蠟切片:
二甲苯中脫蠟 5~10min。
換用新鮮的二甲苯，再脫蠟 5~10min。無(wú)水乙醇 5min。
90%乙醇 2min。
70%乙醇 2min。蒸餾水 2min。
b) 對(duì)于冰凍切片:
蒸餾水 2min。
- 對(duì)于培養(yǎng)細(xì)胞:
用4%多聚甲醛固定 10min 以上。蒸餾水洗滌2分鐘。
換用新鮮的蒸餾水，再洗滌 2min。
2、伊紅染色：對(duì)于上述處理好的樣品，伊紅染色液染色 0.5~2min(根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時(shí)間)。如果需要直接觀察，可以用 70%乙醇洗滌2 次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進(jìn)行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進(jìn)行脫水、透明和封片處理。
注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，參考上述步驟在其它染色完成后進(jìn)行伊紅染色。
3、脫水、透明、封片或進(jìn)行其它染色a)脫水、透明、封片：
95%乙醇脫水 2min。
換用新鮮的 95%乙醇再脫水 2min。二甲苯透明 5min。
換用新鮮的二甲苯，再透明 5min。用中性樹(shù)膠或其它封片劑封片。
顯微鏡下觀察，細(xì)胞漿呈粉紅色或紅色。
b)進(jìn)行其它染色：
如果進(jìn)行免疫熒光染色，或進(jìn)行 Hoechst 等熒光染料的染色，在伊紅染色液染色后：
70％乙醇洗滌 2 次，每次2min。
PBS 或生理鹽水或 TBS 或 TBST 等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5min。
進(jìn)行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色。
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