熒光定量PCR技術(shù)是通過熒光染料或熒光標(biāo)記的特異性探針，對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行標(biāo)記跟蹤，實(shí)時(shí)監(jiān)控反應(yīng)過程。隨著PCR反應(yīng)的進(jìn)行，反應(yīng)產(chǎn)物不斷累積，熒光信號(hào)強(qiáng)度也等比例增加。每經(jīng)過一個(gè)循環(huán)，收集一次熒光強(qiáng)度信號(hào)，這樣就可以通過熒光強(qiáng)度變化監(jiān)測(cè)產(chǎn)物量的變化，結(jié)合相應(yīng)的軟件對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析，可以得到熒光擴(kuò)增曲線，計(jì)算待測(cè)樣品初始模版的量。實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)是一次由定性技術(shù)向定量技術(shù)的飛躍，運(yùn)用該項(xiàng)技術(shù)，可以對(duì)DNA、RNA樣品進(jìn)行相對(duì)定量、定量和定性分析。

　　

　　服務(wù)項(xiàng)目

　　

　　1．相對(duì)定量

　　

　　包括RNA提取、反轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增，采用SYBRGreenI法和TaqMan探針法兩種方式，一般采用2－ΔΔCt法進(jìn)行計(jì)算。每個(gè)樣本重復(fù)三次，一般情況我公司提供內(nèi)參基因引物。

　　

　　2．定量

　　

　　需要制備標(biāo)準(zhǔn)品并建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，然后檢測(cè)目的樣本中的基因，比對(duì)標(biāo)準(zhǔn)曲線得到基因準(zhǔn)確拷貝數(shù)。