MCF-10A-LUC人乳腺上皮細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記
特性：
安全性：所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄。收到細(xì)胞后，在倒置鏡下*好是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況。
（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng)。(二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出一半，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒(méi)有特別說(shuō)明，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二。
注意事項(xiàng)：
1、觀察細(xì)胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度?？醇?xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?/span>10X或20X物鏡下。
2、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素。
3、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi)。
4、收到細(xì)胞后，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們。
MCF-10A-LUC人乳腺上皮細(xì)胞-熒光素酶標(biāo)記
其他服務(wù)項(xiàng)目：
服務(wù)領(lǐng)域 | 服務(wù)內(nèi)容 |
分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn) | 熒光定量PCR、慢病毒/腺病毒包裝、化學(xué)合成序列、全基因合成、原位雜交、甲基化 |
細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗(yàn) | 細(xì)胞分離和鑒定、細(xì)胞耐藥株構(gòu)建、細(xì)胞共培養(yǎng)、外泌體提取、穩(wěn)轉(zhuǎn)株的構(gòu)建 |
蛋白相關(guān)形態(tài)實(shí)驗(yàn) | 蛋白表達(dá)檢測(cè)：Western blot；免疫組化 (IHC)、免疫組化芯片、免疫熒光(IF)、激光共聚焦拍片、 Elisa檢測(cè) |
動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn) | 成瘤實(shí)驗(yàn)：裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)、原位接種成瘤實(shí)驗(yàn) |
DNA/RNA/蛋白相互作用研究實(shí)驗(yàn) | 雙熒光素酶驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)、免疫沉淀（IP）、免疫共沉淀（Co-IP）、染色質(zhì)免疫共沉淀技術(shù)（ChIP）、RIP技術(shù)（RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀）、EMSA實(shí)驗(yàn)、RNA pull down |
高通量分析實(shí)驗(yàn) | 高通量測(cè)序、蛋白質(zhì)組學(xué) |
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