1 色譜柱規(guī)格

通常使用流量：0.5～1.0 mL/min；溶劑置換時(shí)流量：<0.5 mL/min

2 使用注意事項(xiàng)

Ⅰ 流動(dòng)相

  SB-802.5 HQ 是水系凝膠過(guò)濾色譜柱，流動(dòng)相只使用水時(shí)，樣品易發(fā)生吸附。為使樣品完全按照尺寸排阻法來(lái)分離，選擇分析樣品最適合的流動(dòng)相非常關(guān)鍵。

1） 非離子親水性樣品及離子親水性樣品

一般使用鹽溶液或緩沖液。代表性的鹽及緩沖液如下表。

鹽溶液 氯化鈉、硝酸鈉、硫酸鈉、硫酸鉀、硫酸銨

緩沖液 磷酸緩沖液、鹽酸緩沖液、醋酸緩沖液、檸檬酸緩沖液

注意：①流動(dòng)相的鹽濃度要低于0.5M。（適合0.05～0.5M）

鹽濃度在0.2M 以下時(shí)，置換流量0.5mL/min。

鹽濃度在0.2～0.5M 時(shí)，置換流量0.3 mL/min。

②流動(dòng)相PH3～10

③流動(dòng)相含有氯離子的情況下PH 要大于6。

2） 非離子疏水性樣品及離子疏水性樣品

為抑制疏水性樣品的疏水性吸附，流動(dòng)相中添加極性有機(jī)溶劑。

離子性樣品中仍需要加鹽。

置換含有極性有機(jī)溶劑的流動(dòng)相時(shí)，流量設(shè)定為0.5 mL/min。

3） 蛋白質(zhì)樣品

作為蛋白質(zhì)改性劑的尿素或鹽酸胍水溶液可以用作流動(dòng)相。對(duì)于膜蛋白質(zhì)等通常水溶液中溶解性差的樣品，可以添加SDS 或者Brij-35 等界面活性劑于流動(dòng)相中。

Ⅱ 注意事項(xiàng)

1) 色譜柱安裝前，使用流動(dòng)相對(duì)流路進(jìn)行完全置換。

2）色譜柱在高溫下使用，分析結(jié)束后首先將泵的流量設(shè)為0.5mL/min，關(guān)閉色譜柱加熱開(kāi)關(guān)，持續(xù)送液直至色譜柱降至室溫。

  在色譜柱冷卻到室溫前從裝置中取出，色譜柱會(huì)吸入空氣導(dǎo)致性能降低。

3）流動(dòng)相使用了含有鹽的水溶液，或者三天以上不使用的情況下，流路及色譜柱要置換成離子交換水。流量要求0.5mL/min 以下。

4）保護(hù)柱不僅是除去樣品中的污染物來(lái)保護(hù)分析柱的，對(duì)于泵的脈動(dòng)或壓力變化也有一定程度的保護(hù)作用。因此盡量使用保護(hù)柱。

◎如果使用時(shí)超過(guò)了規(guī)定壓力、規(guī)定流量，致使色譜柱性能降低，這是無(wú)法復(fù)原的，對(duì)此請(qǐng)?zhí)貏e注意。

3 色譜柱性能的測(cè)試方法

按照下面的條件，對(duì)色譜柱進(jìn)行性能測(cè)試（詳情請(qǐng)參考色譜柱附帶的出廠檢查報(bào)告COA）

理論塔板數(shù)的計(jì)算公式