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CUT和Tag: 新型蛋白質-DNA互作研究工具
表觀遺傳學研究中，在分子層面研究蛋白質與DNA之間的相互作用有助于我們更深入的理解特定細胞功能和疾病發(fā)病機制。CST為了幫助科研人員更快的獲得可靠的實驗結果，進一步擴大了蛋白質-DNA互作研究產品組合，重磅推出了完整的CUT&Tag（Cleavage Under Targets and Tagmentation）解決方案，包括CUT&Tag試劑盒（#77552）、 建庫試劑盒（#47415）、抗體和適用于細胞以及組織的實驗步驟說明書。
CUT&Tag實驗步驟
對于CST CUT&Tag實驗，首先將細胞與刀豆蛋白A包被的磁珠混合。洋地黃皂苷的透化處理可以讓靶標特異性的一抗進入細胞并結合目的蛋白。由于需要將信號放大，因此還要添加二抗。隨后進行預裝接頭的高活性CUT&Tag pAG-Tn5 (Loaded) （#79561）融合轉座酶的孵育，轉座酶進入細胞后可以通過pAG結構域與二抗結合，這樣就使轉座酶與靶標蛋白間接聯(lián)系起來。加入Mg2+激活轉座酶活性后，目標基因組 DNA 會被切割并就地連接接頭 DNA，最后進行DNA純化和PCR擴增。由于省去了體外接頭連接步驟，CUT&Tag可以節(jié)省您寶貴的時間，讓您在更短的時間內進行蛋白質-DNA相互作用研究。
圖1：CUT&Tag 實驗原理
CUT&Tag為何與眾不同？
雖然ChIP仍然是研究蛋白質-DNA相互作用的主要方法，但隨著新的研究工具的出現(xiàn)，例如CUT&RUN以及CUT&Tag，傳統(tǒng)ChIP-Seq實驗需要大量樣品，重復性差、高背景等問題得到了解決。CST CUT&Tag試劑盒（#77552）經(jīng)過了嚴格驗證，適用于細胞和組織樣品中多種靶標類型，并包含了陽性對照抗體Tri-Mmethyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751和陰性對照抗體Normal Rabbit IgG #2729 / Normal Mouse IgG #68860，以及抗兔和抗鼠的二抗。同時，當樣品量不足時，該試劑盒還可以幫助您更快獲得實驗結果，節(jié)省測序成本，并使單細胞染色質分析成為可能。
圖2：CUT&Tag優(yōu)勢
此外，CST還專門針對CUT&Tag驗證了多種一抗，包括組蛋白靶標和部分非組蛋白靶標，以確保實驗結果的可重復性和可靠性。
CUT&Tag 試劑為您提供高質量數(shù)據(jù)
一、組蛋白修飾分析
1、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對HCT 116細胞進行CUT&Tag實驗。
2、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對低細胞數(shù)量的NCCIT細胞進行CUT&Tag實驗。
二、轉錄因子和輔因子分析
1、使用Nanog (D2A3) XP Rabbit mAb (Mouse Specific) #8822對F9細胞進行CUT&Tag實驗。
2、使用 JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb #13594 對NCCIT細胞進行CUT&Tag實驗。
3、使用ATF-4 (D4B8) Rabbit mAb #11815對低細胞數(shù)量的Hep G2細胞進行CUT&Tag實驗。
三、組織樣品分析
1、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對小鼠腦組織進行CUT&Tag實驗。
2、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對小鼠肝組織進行CUT&Tag實驗。
3、使用Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb #9751對小鼠心臟組織進行CUT&Tag實驗。
CST經(jīng)過嚴格驗證的一站式CUT&Tag解決方案現(xiàn)已全面上線：CUT&Tag試劑盒（#77552） + 一抗和二抗 + 建庫試劑盒（#47415）
CUT&Tag試劑盒和試劑
| 貨號 | 產品名稱 | 規(guī)格 |
| 77552 | CUT&Tag Assay Kit | 1 kit |
| 79561 | CUT&Tag pAG-Tn5 (Loaded) | 100ul |
| 47415 | CUT&Tag Dual Index Primers and PCR Master Mix for Illumina Systems | 1 kit |
| 63228 | CUT&Tag PCR Master Mix | 840ul |
部分CUT&Tag驗證抗體列表
| 貨號 | 品名 |
| 8173 | Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) Xpe Rabbit mAb |
| 9649 | Acetyl-Histone H3 (Lys9) (C5B11) Rabbit mAb |
| 52885 | Anti-mouse secondary Ab |
| 35401 | Anti-rabbit secondary Ab |
| 11815 | ATF-4 (D4B8) Rabbit mAb |
| 6964 | Bmi1 (D20B7) Xe Rabbit mAb |
| 5856 | Bmi1 (D42B3) Rabbit mAb |
| 25069 | CBX2 (EЗN6A) Rabbit mAb |
| 14696 | CBX8 (D208C) Rabbit mAb |
| 3418 | CTCF (D31H2) Xpe Rabbit mAb |
| 9725 | Di-Methyl-Histone H3 (Lys4)(C64G9) Rabbit mAb |
| 4658 | Di-Methyl-Histone H3 (Lys9) (D85B4) Xp® Rabbit mAb |
| 32578 | DNMT3A(D2H4B) Rabbit mAb |
| 57868 | DNMTЗB (E8A8A) xpe Rabbit mAb |
| 85322 | EED (E4L6E) XP® Rabbit mAb |
| 5246 | Ezh2 (D2C9) XP3 Rabbit mAb |
| 5851 | GATA-6 (D61E4) Xp® Rabbit mAb |
| 42427 | Helios (D8W4X) XP3 Rabbit mAb |
| 13594 | JARID2 (D6M9X) Rabbit mAb |
| 97800 | MITF (D3B4T)Rabbit mAb |
| 14689 | MLL1 (D2M7U) Rabbit mAb (Amino-terminal Antigen) |
| 14111 | Mono-Methyl-Histone H3 (Lys36) (D9J1D) Rabbit mAb |
| 5326 | Mono-MethylHistone H3 (Lys4) (D1A9) Xp® Rabbit mAb |
| 5232 | Nanog (D73G4} XP® Rabbit mAb (ChiP Formulated) |
| 68860 | Normal Mouse lgG |
| 13499 | Phospho-Rpb1 cTD (Ser2) (E1Z3G) Rabbit mAb |
| 13546 | Phospho-Rpb1 cTD (ser2/ser5) (D1G3K) Rabbit mAb |
| 2729 | Rabbit lgG |
| 2629 | Rpb1 CTD (4H8) Mouse mAb |
| 11956 | SMARCC1/BAF155 (D7F8S) Rabbit mAb |
| 2569 | TCF4/TCF7L2 (C48H11) Rabbit mAb |
| 9733 | Tri-Methyl-Histone H3 (Lys27) (C36B11) Rabbit mAb |
| 9751 | Tri-Methyl-Histone H3 (Lys4) (C42D8) Rabbit mAb |
| 5737 | Tri-Methyl-Histone H4 (Lys20)(D84D2) Rabbit mAb |
| 8240 | ubiquityi-Histone H2A (Lys119} (D27C4) Xpe Rabbit mAb |
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| 貨號 | 產品 | 應用 |
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