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目錄:上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司>>單細(xì)胞測序>>測序試劑盒>> 20024904illumina NextSeq 500/550 測序試劑盒現(xiàn)貨

illumina NextSeq 500/550 測序試劑盒現(xiàn)貨
  • illumina NextSeq 500/550 測序試劑盒現(xiàn)貨
參考價(jià) 面議
具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
參考價(jià) 面議
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  • 品牌 illumina/美國因美納
  • 型號(hào) 20024904
  • 廠商性質(zhì) 代理商
  • 所在地 上海市
屬性

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更新時(shí)間:2024-12-25 14:27:29瀏覽次數(shù):361評(píng)價(jià)

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產(chǎn)品名稱:illumina NextSeq 500/550 v2.5測序試劑盒(150 cycles)現(xiàn)貨供應(yīng)

產(chǎn)品貨號(hào):20024904

產(chǎn)品品牌:illumina/美國因美納

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llumina二代測序技術(shù),邊合成邊測序(SBS),是廣泛采用的新一代測序(NGS)技術(shù),負(fù)責(zé)產(chǎn)生世界上90%以上的測序數(shù)據(jù)。

Illumina的二代測序技術(shù)稱為邊合成邊測序(Sequencing-by-Synthesis,簡稱SBS)。SBS主要包括堿基延伸、熒光激發(fā)及信號(hào)收集、剪切等3個(gè)步驟。這3個(gè)步驟可以重復(fù),循環(huán)進(jìn)行。每循環(huán)一次測定一個(gè)堿基。想測定多少個(gè)堿基(即讀長),就循環(huán)多少次。測序循環(huán)次數(shù)可以在軟件里設(shè)定。到底測序多長合適,要根據(jù)項(xiàng)目性質(zhì)和需求來決定。大多數(shù)情況下,SR實(shí)驗(yàn)(單端測序)測定1x50個(gè)堿基,PE實(shí)驗(yàn)(雙端測序)測定2x150個(gè)堿基。

1 堿基延伸

Illumina測序試劑里所使用的dNTP特色,它們同時(shí)具有兩個(gè)修飾基團(tuán):一個(gè)熒光基團(tuán),一個(gè)可逆終止基團(tuán)。A、G、C、T 4種堿基分別標(biāo)記4種不同的熒光基團(tuán),它們在不同波長的激光激發(fā)下,能夠發(fā)射不同波長(即顏色)的熒光。熒光顏色與堿基種類一一對應(yīng),因此根據(jù)激發(fā)光的波長可以識(shí)別堿基。4種堿基的終止基團(tuán)是一樣的。由于終止基團(tuán)的存在,所有dNTP每次都只能延伸1個(gè)堿基,無論給予多長的反應(yīng)時(shí)間。又由于該終止基團(tuán)是可逆的,在熒光信號(hào)收集完畢之后,可以用剪切劑切除該終止基團(tuán),使堿基恢復(fù)自然的可延伸狀態(tài),這時(shí)即可繼續(xù)進(jìn)行下一輪循環(huán),再測定一個(gè)堿基。

可逆終止基團(tuán)技術(shù)是Illumina二代測序的一大特色。它與橋式PCR技術(shù)一起,構(gòu)成了Illumina二代測序的兩大支柱,為穩(wěn)定獲得高質(zhì)量的測序數(shù)據(jù)打下了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。

2 信號(hào)采集

HiSeq系列測序儀具有紅綠兩根激光管,兩個(gè)濾色片。它們兩兩組合,可以形成4種不同的激發(fā)波長,正好分別用于激發(fā)A、G、C、T 4種堿基。

Cluster上所標(biāo)記的熒光基團(tuán)在激光激發(fā)下產(chǎn)生的信號(hào),可以用相機(jī)拍攝或者掃描的方式收集信號(hào)。掃描技術(shù)速度比較快,被X10系列采用。由于FC面積比較大,而且上表面和下表面要分別拍照,所以拍照過程相當(dāng)耗時(shí)。對于經(jīng)典的HiSeq 2000來說,一次測序循環(huán)所產(chǎn)生的熒光信號(hào),需要大約40分鐘的時(shí)間才能拍照收集完畢,時(shí)間比測序反應(yīng)本身還要長。

3 剪切

熒光信號(hào)收集完畢后,關(guān)閉激光,用剪切劑去除測序引物的延伸產(chǎn)物上的堿基所標(biāo)記的熒光基團(tuán)和終止基團(tuán)。兩個(gè)修飾基團(tuán)均被切除,一方面消去干擾熒光,一方面使鏈末端的堿基回復(fù)到自然的可延伸狀態(tài),為下一輪測序做好準(zhǔn)備。

再重復(fù)合成、激發(fā)、收集等步驟,即可進(jìn)行第二個(gè)堿基的測序。

測序循環(huán)可以重復(fù)多次。理論上可以一直重復(fù),直到信噪比降低得無法有效識(shí)別堿基信號(hào)為止。由于熒光基團(tuán)的發(fā)光效率持續(xù)不斷在衰減,Taq酶的活性也在持續(xù)不斷地衰減,所以實(shí)際上測序循環(huán)次數(shù)是有限的,大重復(fù)次數(shù)與sbs試劑的配方有關(guān)。測序的循環(huán)次數(shù)可以在軟件設(shè)置過程中人為,這個(gè)重復(fù)次數(shù)就是每個(gè)測序片段的讀長。目前,Illumina平臺(tái)的讀長有2x100 bp,2x125 bp,2x150 bp,2x300 bp等多種,其中2x150 bp用得較廣泛。

 

單端測序:單端測序(Single-read)首先將DNA樣本進(jìn)行片段化處理形成200-500bp的片段,引物序列連接到DNA片段的一端,然后末端加上接頭,將片段固定在flow cell上生成DNA簇,上機(jī)測序單端讀取序列。

雙端測序:雙端測序(Paired-end)方法是指在構(gòu)建待測DNA文庫時(shí)在兩端的接頭上都加上測序引物結(jié)合位點(diǎn),在*輪測序完成后,去除*輪測序的模板鏈,用對讀測序模塊(Paired-End Module)引導(dǎo)互補(bǔ)鏈在原位置再生和擴(kuò)增,以達(dá)到第二輪測序所用的模板量,進(jìn)行第二輪互補(bǔ)鏈的合成測序。

 

基因組文庫是指將某生物的全部基因組DNA切割成一定長度的DNA 片段克隆到某種載體上而形成的集合?;蚪M文庫根據(jù)DNA 來源又分為核基因組文庫、葉綠體基因組文庫及線粒體基因組文庫?;蚪M文庫構(gòu)建時(shí)遺傳信息供體是基因組DNA,因而無發(fā)育時(shí)期及組織器官特異性,在一個(gè)*的基因組文庫中包含著基因組DNA 上的所有編碼區(qū)及非編碼區(qū)序列的克隆; 生物有機(jī)體的每一個(gè)基因在文庫中都有其克隆,該克隆的基因片段里包括著間隔序列,所以基因組文庫可真實(shí)地顯示基因組的全部結(jié)構(gòu)信息。

基因組文庫(Genomic Library)定義:把某種生物基因組的全部遺傳信息通過克隆載體貯存在一個(gè)受體菌克隆子群體中,這個(gè)群體即為這種生物的基因組文庫。

 


20024904 illumina測序試劑盒v2.5 現(xiàn)貨折扣

產(chǎn)品名稱:illumina 20024904 NextSeq 500/550 v2.5測序試劑盒(150 cycles)

產(chǎn)品貨號(hào):20024904

產(chǎn)品品牌:illumina/美國因美納

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品牌                產(chǎn)品貨號(hào)           產(chǎn)品名稱

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illumina品牌        FC-404-2004        NextSeq 500/550 High Output v2 kit (300 cycles)基因測序試劑盒

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產(chǎn)品名稱:NextSeq 500/550 Mid Output Kit v2.5 (150 Cycles)

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