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怎樣避免細(xì)胞污染
閱讀：1112發(fā)布時(shí)間：2022-6-27
細(xì)胞是構(gòu)成人體結(jié)構(gòu)和功能的最基本單位，人體就是由大量的不同類型的細(xì)胞組成的，在不同的組織器官，含有不同的細(xì)胞，分別具有不同的結(jié)構(gòu)，執(zhí)行不同的功能。比如血液中有三種血細(xì)胞，分別是紅細(xì)胞白細(xì)胞和血小板，紅細(xì)胞具有運(yùn)輸氧氣和二氧化碳的功能，白細(xì)胞在人體的免疫功能中發(fā)揮著重要作用，血小板是人體負(fù)責(zé)止血的血細(xì)胞。另外，人體還有多種其他類型的細(xì)胞，分別執(zhí)行著不同的功能。
怎樣避免細(xì)胞污染：
1.實(shí)驗(yàn)進(jìn)行前，超凈臺(tái)用紫外燈照射30-60min，然后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，并開啟超凈臺(tái)風(fēng)機(jī)運(yùn)轉(zhuǎn)5-10min再開始實(shí)驗(yàn)操作。
2.實(shí)驗(yàn)用品用75%酒精擦拭后才能放入超凈臺(tái)內(nèi)；實(shí)驗(yàn)用品用完應(yīng)移出超凈臺(tái)，以利于空氣的流通；實(shí)驗(yàn)完成后用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面。
3.每次操作只處理一種細(xì)胞；即使不同細(xì)胞使用相同的培養(yǎng)基也不要共享同一瓶培養(yǎng)基，避免細(xì)胞間的交叉污染。
4.操作時(shí)小心取用無(wú)菌的物品，避免污染。勿碰觸吸管尖頭，不小心碰觸后應(yīng)立即更換；不要在打開的容器瓶口正上方操作，容器打開后，傾斜45°操作，操作完成后及時(shí)蓋上瓶蓋。
5.CO2培養(yǎng)箱的清潔是較易被忽視的地方，應(yīng)1-2個(gè)月對(duì)培養(yǎng)箱定期進(jìn)行清潔消毒。先用75%酒精擦拭培養(yǎng)箱內(nèi)壁、隔板、水盤2-3次，用雙蒸水清洗，再用酒精棉球擦拭一遍，最后紫外燈照射4h以上。水盤內(nèi)加入無(wú)菌水（應(yīng)每周更換），待培養(yǎng)箱內(nèi)溫度、濕度、CO2濃度穩(wěn)定后再放入細(xì)胞。
6.定期清洗或更換超凈臺(tái)過濾膜、預(yù)濾網(wǎng)。
注意事項(xiàng)：
1、 DMSO配制的時(shí)候會(huì)放熱，一定要等凍存液冷卻后使用，避免灼傷細(xì)胞；
2、 細(xì)胞離心后盡量吸干凈上清液，減少培養(yǎng)基殘留，避免稀釋凍存液；
3、 不建議手動(dòng)梯度降溫，溫度不穩(wěn)定，容易降低存活率；
4、 注意程序降溫盒內(nèi)異丙醇的量必須高于低刻度線；凍存5次后異丙醇需要更換一次，以免影響凍存效果；程序降溫盒需恢復(fù)到室溫以后才能繼續(xù)使用，不能從冰箱拿出來(lái)直接使用；
5、 細(xì)胞懸液加入凍存液以后盡量短時(shí)間的在常溫放置，DMSO常溫下對(duì)細(xì)胞損傷大，分裝完成后立即轉(zhuǎn)入程序降溫盒放到-80度冰箱，不需要放4度；
6、 -80度凍存過夜后可以轉(zhuǎn)入液氮長(zhǎng)期保存，轉(zhuǎn)入液氮的過程需要對(duì)凍存盒進(jìn)行保冷，不要長(zhǎng)時(shí)間在常溫暴露，避免凍存管融化；
7、 若沒有液氮罐，存放在-80度的時(shí)候一定要放靠里面的位置，避免開關(guān)冰箱導(dǎo)致溫度不穩(wěn)定。
8、 細(xì)胞凍存后應(yīng)取出一管復(fù)蘇，檢測(cè)細(xì)胞的存活率。理論上細(xì)胞可在液氮內(nèi)長(zhǎng)期保存，為穩(wěn)妥起見可在細(xì)
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