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人軍團(tuán)菌抗體IgM LPAb-IgM ELISA

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所  在  地:上海市

更新時(shí)間:2025-03-18 09:40:39瀏覽次數(shù):571

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人軍團(tuán)菌抗體IgM LPAb-IgM ELISA ,借間接法測(cè)血清抗體。經(jīng)規(guī)范采樣、加樣等操作,靈敏度高、特異性強(qiáng),用于軍團(tuán)菌肺炎早診、疫情監(jiān)測(cè)與病情追蹤 。
人軍團(tuán)菌抗體IgM LPAb-IgM ELISA  檢測(cè)介紹
人軍團(tuán)菌抗體IgM LPAb-IgM ELISA 檢測(cè),是運(yùn)用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)技術(shù),對(duì)人血清樣本中軍團(tuán)菌 IgM 抗體進(jìn)行定性或定量分析的重要方法,在軍團(tuán)菌感染相關(guān)疾病的診斷與防控中意義重大。
檢測(cè)原理
該檢測(cè)基于間接 ELISA 法。ELISA 試劑盒內(nèi)的微孔板預(yù)先包被有純化的軍團(tuán)菌抗原。當(dāng)加入待測(cè)血清樣本時(shí),若樣本中存在軍團(tuán)菌 IgM 抗體,抗體將與包被在微孔板上的軍團(tuán)菌抗原特異性結(jié)合。接著加入酶標(biāo)記的抗人 IgM 抗體,其會(huì)與已結(jié)合在抗原上的軍團(tuán)菌 IgM 抗體進(jìn)一步結(jié)合,從而形成 “包被抗原 - 軍團(tuán)菌 IgM 抗體 - 酶標(biāo)抗人 IgM 抗體" 復(fù)合物。加入底物溶液后,在酶的催化作用下,底物發(fā)生顯色反應(yīng),顏色的深淺與樣本中軍團(tuán)菌 IgM 抗體的含量成正比。通過酶標(biāo)儀在特定波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD 值),與試劑盒提供的臨界值比較,可判斷樣本中是否含有軍團(tuán)菌 IgM 抗體;若需定量檢測(cè),依據(jù)預(yù)先繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線,能精確計(jì)算出抗體含量。
操作流程
  1. 樣本采集:采集適量人靜脈血,室溫靜置,待血液自然凝固后,通過離心分離獲取血清樣本。采血過程必須嚴(yán)格遵循無菌操作規(guī)范,防止樣本污染。采集后的血清樣本若不能立即檢測(cè),需妥善保存于 -20℃冰箱,且要避免反復(fù)凍融,以免影響抗體活性。

  1. 試劑盒準(zhǔn)備:從冰箱取出 ELISA 試劑盒,在室溫(20℃ - 25℃)下平衡 30 分鐘,確保試劑盒內(nèi)各試劑溫度均勻。同時(shí)準(zhǔn)備好移液器、吸頭、酶標(biāo)儀等實(shí)驗(yàn)器材,并仔細(xì)檢查其性能是否正常,以保證檢測(cè)過程順利進(jìn)行。

  1. 加樣:將標(biāo)準(zhǔn)品(如有)、待測(cè)血清樣本及空白對(duì)照按規(guī)定體積準(zhǔn)確加入微孔板相應(yīng)孔中,輕輕振蕩混勻,使樣本與包被抗原充分接觸,隨后在設(shè)定溫度下孵育一定時(shí)間,促進(jìn)抗原抗體反應(yīng)充分進(jìn)行。

  1. 洗板:孵育結(jié)束后,棄去孔內(nèi)液體,用洗滌液充分洗滌微孔板 3 - 5 次,徹di清除未結(jié)合的物質(zhì),有效降低非特異性信號(hào)干擾。每次洗滌后需將微孔板拍干,避免殘留液體影響后續(xù)反應(yīng)結(jié)果。

  1. 加酶標(biāo)抗體:向各孔加入適量酶標(biāo)抗人 IgM 抗體,振蕩混勻后再次孵育,使酶標(biāo)抗體與已結(jié)合的軍團(tuán)菌 IgM 抗體充分結(jié)合。

  1. 顯色與終止:加入底物顯色液,在避光條件下孵育,待顏色變化至合適程度時(shí),加入終止液終止反應(yīng),使反應(yīng)停止在最佳檢測(cè)狀態(tài),便于準(zhǔn)確讀取結(jié)果。

  1. 結(jié)果判定:立即使用酶標(biāo)儀在規(guī)定波長(zhǎng)下測(cè)定各孔 OD 值。若樣本 OD 值大于試劑盒給定的臨界值,則判定為陽性,表明樣本中存在軍團(tuán)菌 IgM 抗體;若樣本 OD 值小于等于臨界值,則判定為陰性,即樣本中未檢測(cè)到軍團(tuán)菌 IgM 抗體。對(duì)于具有定量功能的檢測(cè),可根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算出樣本中軍團(tuán)菌 IgM 抗體的具體含量。

性能優(yōu)勢(shì)
  1. 高靈敏度:能夠檢測(cè)到極微量的軍團(tuán)菌 IgM 抗體,有助于在感染早期,抗體水平較低時(shí),及時(shí)發(fā)現(xiàn)感染情況,為早期診斷提供有力支持。

  1. 特異性強(qiáng):試劑盒中的抗原和酶標(biāo)抗體具有高度特異性,與其他病原體抗體交叉反應(yīng)極小,能準(zhǔn)確識(shí)別軍團(tuán)菌 IgM 抗體,保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,減少誤診和漏診情況的發(fā)生。

  1. 操作簡(jiǎn)便:整個(gè)檢測(cè)流程相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化,操作步驟清晰明了,經(jīng)過簡(jiǎn)單培訓(xùn)的人員即可熟練操作,適用于各級(jí)醫(yī)療機(jī)構(gòu)和實(shí)驗(yàn)室開展檢測(cè)工作。

  1. 結(jié)果穩(wěn)定:在規(guī)定的保存條件下,試劑盒內(nèi)各試劑性能穩(wěn)定,多次檢測(cè)同一批樣本,結(jié)果重復(fù)性良好,為臨床診斷和病情監(jiān)測(cè)提供可靠的數(shù)據(jù)支持。

臨床應(yīng)用場(chǎng)景
  1. 軍團(tuán)菌肺炎早期診斷:軍團(tuán)菌感染人體后,機(jī)體最先產(chǎn)生 IgM 抗體。通過檢測(cè)血清中軍團(tuán)菌 IgM 抗體,可在感染初期快速診斷軍團(tuán)菌肺炎,為患者及時(shí)治療爭(zhēng)取寶貴時(shí)間,提高治yu率。

  1. 疫情監(jiān)測(cè)與防控:在軍團(tuán)菌疫情可能爆發(fā)的區(qū)域,對(duì)人群進(jìn)行血清學(xué)篩查,檢測(cè)軍團(tuán)菌 IgM 抗體,能夠及時(shí)發(fā)現(xiàn)潛在感染人群,有效控制疫情傳播,為公共衛(wèi)生防控提供重要依據(jù)。

  1. 感染病情監(jiān)測(cè):對(duì)于已確診的軍團(tuán)菌感染患者,定期檢測(cè)血清中軍團(tuán)菌 IgM 抗體水平,可了解病情發(fā)展及治療效果。若抗體水平逐漸下降,提示治療有效;若抗體水平持續(xù)升高或維持在較高水平,可能意味著感染未得到有效控制,需調(diào)整治療方案。


 

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