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DNA退火緩沖液

閱讀:3519      發(fā)布時(shí)間:2014-9-29
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退火緩沖液(5×)說明書
貨號(hào):D2810
規(guī)格:1ml/5ml
保存:室溫儲(chǔ)存,有效期少12個(gè)月。
產(chǎn)品說明:
DNA 退火緩沖液(Annealing Buffer for DNA Oligos),即DNA 寡核苷酸退火緩沖液,該退火緩沖液不僅可以
用于常規(guī)的DNA Oligo 的退火,而且特別適合于較難退火的用于siRNA 質(zhì)粒構(gòu)建的DNA Oligo 的退火。使用
DNA 退火緩沖液(5×)可以有效避免DNA Oligo 自身形成發(fā)夾結(jié)構(gòu),并且兩條Oligo 退火后可以直接和經(jīng)酶
切純化的質(zhì)粒連接。通常轉(zhuǎn)化后可以得到大量的陽性克隆。
使用本試劑操作非常簡(jiǎn)單,只需把待退火的DNA Oligo 和DNA 退火緩沖液(5×)按照一定比例混合后,
置于PCR 儀上,約60 分鐘即可完成。
操作步驟:
1. 用去離子水將DNA 退火緩沖液(5×)稀釋成1×工作濃度。
2. 用DNA 退火緩沖液(1×)分別溶解互補(bǔ)的兩條DNA 寡核苷酸單鏈,使它們的摩爾濃度相等;
3. 取相同體積的步驟2 中得到的寡核苷酸單鏈溶液混合,置于PCR 反應(yīng)管中,樣品不要用礦物油覆蓋。
4. 將PCR 反應(yīng)管置于PCR 儀中,設(shè)置反應(yīng)條件: 95℃變性2min;緩慢降溫25℃,降溫過程用時(shí)少
45min;產(chǎn)物可4℃短暫保存,用于后續(xù)實(shí)驗(yàn)。長(zhǎng)期保存可于-20℃凍存。
注意事項(xiàng):
1. DNA 退火緩沖液(5X) 只適合于DNA oligo 的退火,不能用于RNA oligo 的退火。
2. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
 

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