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D2100-基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒
  • D2100-基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒
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貨物所在地:北京北京市

地: 北京

更新時間:2025-03-23 21:00:07

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基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒
貨號:D2100
規(guī)格:50T、100T
本試劑盒為通用型,適合于從土壤,糞便,昆蟲,以及其他樣本中提取基因組 DNA。對細(xì)菌,真菌,昆蟲等樣本都具有很好的裂解效果,Z大限度的保留了生物 DNA 的多態(tài)性。

基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒
貨號:D2100
規(guī)格:50T、100T
保存:室溫(15℃-25℃) 干燥保存,復(fù)檢期 12 個月,2℃-8℃保存時間更長。開封后請將 RNase A,蛋白酶 K于-20℃保存。


產(chǎn)品說明:
    本試劑盒為通用型,適合于從土壤,糞便,昆蟲,以及其他樣本中提取基因組 DNA。對細(xì)菌,真菌,昆蟲等樣本都具有很好的裂解效果,大限度的保留了生物 DNA 的多態(tài)性。使用本試劑盒提取的 DNA 產(chǎn)量大、完整性好,可直接用于各種常規(guī)操作,包括酶切、PCR 、文庫構(gòu)建、Southern 雜交等實驗。


產(chǎn)品包裝:


 

操作步驟:
    使用前請先在漂洗液中加入無水乙醇,加入體積請參照瓶上的標(biāo)簽。所有離心步驟均為使用臺式離心機(jī)在室溫下離心。
1、樣品的處理:
    1)土壤:稱取 0.1-0.3g (根據(jù)干濕)土壤,放入研缽中,倒入適量的液氮,立即研磨,重復(fù) 3 次,使土壤顆粒研成粉末,加 500ul 溶液 A,振蕩*懸浮。
    2)糞便:稱取 0.1-0.3g (根據(jù)干濕) 糞便,加 500ul 溶液 A,振蕩*懸浮。
    3)昆蟲:稱取 0.1-0.3g 昆蟲,倒入適量的液氮,立即研磨,重復(fù) 3 次,使昆蟲研成粉末,加 500ul 溶液A,振蕩*懸浮。
    4)未知樣品,如為細(xì)未狀,可直接稱取 0.1-0.3g(根據(jù)干濕)加 500ul 溶液 A,如為塊狀,可 0.1-0.3g 用液氮研磨成粉未,再加 500ul 溶液 A,振蕩*懸浮。2、向懸浮液中加入 20ul 10mg/ml 的 RNase A,55℃放置 10min。3、加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K,充分混勻,55℃水浴消化,30min。消化期間可顛倒離心管混勻數(shù)次,12000轉(zhuǎn)離心 10min。將上清轉(zhuǎn)移到一個新的離心管中。如有沉淀,可再次離心。
4、加入 500ul 溶液 B,充分混勻。如出現(xiàn)白色沉淀,于 55℃放置 5min,沉淀即會消失,不影響后續(xù)實驗。如溶液未變清亮,說明樣品消化不*,可能導(dǎo)致提取的 DNA 量少及不純,還有可能導(dǎo)致上柱后堵柱子,請增加消化時間。
5、加入 500ul 無水乙醇,充分混勻,此時可能會出現(xiàn)絮狀沉淀,不影響 DNA 的提取,可將溶液和絮狀沉淀都加入吸附柱中,放置 2min (分兩次加入,每次 700ul)。
6、12000rpm 離心 2min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
7、向吸附柱中加入 700ul 漂洗液(使用前請先檢查是否已加入無水乙醇),12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中。
8、向吸附柱中加入 500ul 漂洗液,12000rpm 離心 1min,棄廢液,將吸附柱放入收集管中
9、12000rpm 離心 2min,將吸附柱置于室溫或 50℃溫箱放置數(shù)分鐘,目的是將吸附柱中殘余的漂洗液去除,否則漂洗液中的乙醇會影響后續(xù)的實驗如酶切、PCR 等。
10、將吸附柱放入一個干凈的離心管中,向吸附膜*懸空滴加 50-200ul 經(jīng) 65℃水浴預(yù)熱的洗脫液,室溫放置5min,12000rpm 離心 2min。
11、離心所得洗脫液再加入吸附柱中,室溫放置 2min,12000rpm 離心 2min,即可得到高質(zhì)量的基因組 DNA.。


注意事項:

1、由于樣品不同,終提取的 DNA 含量和純度也有所不同,一般來說,如果所提取 DNA 用電泳的方法檢測不到,PCR 會有結(jié)果,樣品盡可能的新鮮。否則會導(dǎo)致提取的 DNA 片段較小且提取量也下降。
2、若試劑盒中的溶液出現(xiàn)沉淀,可在 65℃水浴中重新溶解后再使用,不影響提取效果。
3、如果樣品消化不*,后面的離心步驟中可能會出現(xiàn)堵柱子的情況,可適當(dāng)延長離心時間。
4、洗脫緩沖液的體積好不少于 50ul,體積過小會影響回收效率;洗脫液的 pH 值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應(yīng)保證其 pH 值在 8.0 左右(可用 NaOH 將水的 pH 值調(diào)此范圍),pH 值低于 7.0 會降低洗脫效率;DNA 產(chǎn)物應(yīng)保存在-20℃,以防 DNA 降解。
5、DNA濃度及純度檢測(濃度較高時):得到的基因組DNA片段的大小與樣品保存時間、操作過程中的剪切力等因素有關(guān)。 回收得到的DNA片段可用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計檢測濃度與純度。 DNA應(yīng)在OD 260 處有顯著吸收峰, OD 260 值為 1 相當(dāng)于大約 50μg/ml雙鏈DNA、 40μg/ml單鏈DNA。 OD 260 /OD 280 比值應(yīng)為 1.7-1.9,如果洗脫時不使用洗脫緩沖液,而使用去離子水,比值會偏低,因為pH值和離子存在會影響光吸收值,但并不表示純度低。


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基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒訂購說明:

1、絕大部分產(chǎn)品備有現(xiàn)貨,一般情況下都能訂貨當(dāng)日發(fā)貨。 
2、部分非常用產(chǎn)品,需提前1-2日預(yù)訂,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。 
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當(dāng)日新價格為準(zhǔn)。 
4、每日訂單截止時間為16點整,部分城市可到17點整,因超過截止時間造成當(dāng)日不能發(fā)貨的將于次日安排發(fā)貨。
5、請辦理完貨款后,將收據(jù)、底單等連同收貨人的地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知我們。


基因組提取試劑盒通用基因組DNA提取試劑盒運輸說明:

1、極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰運輸。用干冰把產(chǎn)品包裹起來,再用泡沫盒密封,膠帶層層粘住泡沫盒,放入索萊寶的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
2、低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝索萊寶冰袋運輸。事先用冰袋把產(chǎn)品包裹起來,再使用泡沫盒密封,用膠帶嚴(yán)實密封泡沫盒,再放入索萊寶的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速高效放心的送客戶的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一,為您的實驗保駕護(hù)航。
3、常溫產(chǎn)品:常溫產(chǎn)品運輸過程中無需加冰或者特殊包裝。產(chǎn)品由公司庫房人員快速配貨,準(zhǔn)確快速高效的快遞保證產(chǎn)品快速送達(dá)您的手中。

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