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人絲裂原激活的蛋白激酶試劑盒
人絲裂原激活的蛋白激酶試劑盒，是一款用于精確檢測(cè)人體樣本中 MAPK 含量的專(zhuān)業(yè)工具，在生命科學(xué)研究與臨床診斷等方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用。
該試劑盒主要基于酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）技術(shù)。其核心原理是利用抗原與抗體的特異性結(jié)合特性。試劑盒內(nèi)的酶標(biāo)板事先已包被針對(duì) MAPK 的特異性抗體。當(dāng)含有 MAPK 的樣本，如血清、血漿、細(xì)胞裂解液等加入到酶標(biāo)板孔中后，樣本里的 MAPK 會(huì)與包被抗體精準(zhǔn)結(jié)合。接著，加入酶標(biāo)記的另一種針對(duì) MAPK 不同抗原表位的檢測(cè)抗體，形成穩(wěn)固的 “包被抗體 - MAPK - 酶標(biāo)檢測(cè)抗體" 三明治結(jié)構(gòu)。隨后添加酶的底物，酶標(biāo)抗體上的酶催化底物發(fā)生化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)，比如顏色變化或者熒光信號(hào)。通過(guò)酶標(biāo)儀測(cè)定信號(hào)強(qiáng)度，并與試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)比，就能準(zhǔn)確計(jì)算出樣本中 MAPK 的含量。
試劑盒組成豐富且完備，一般包含預(yù)包被抗體的酶標(biāo)板，用于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的不同濃度 MAPK 標(biāo)準(zhǔn)品，酶標(biāo)抗體工作液、底物、終止液，以及用于清洗未結(jié)合物質(zhì)的濃縮洗滌液等。同時(shí)，配有詳細(xì)的操作說(shuō)明書(shū)，指導(dǎo)實(shí)驗(yàn)人員規(guī)范操作。
使用時(shí)，需先將樣本和試劑盒中的試劑平衡至室溫，按要求對(duì)樣本和相關(guān)試劑進(jìn)行稀釋。準(zhǔn)確加樣到酶標(biāo)板后，在適宜溫度下溫育一段時(shí)間，讓抗原抗體充分反應(yīng)。之后用洗滌液多次洗滌酶標(biāo)板，去除未結(jié)合物質(zhì)，減少非特異性信號(hào)干擾。接著依次加入酶標(biāo)抗體工作液、底物，按規(guī)定時(shí)間反應(yīng)，最后加入終止液終止反應(yīng)，并立即用酶標(biāo)儀檢測(cè)信號(hào)。
該試劑盒具有操作簡(jiǎn)便、靈敏度高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好等優(yōu)點(diǎn)。在基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究中，有助于深入探究 MAPK 信號(hào)通路在細(xì)胞增殖、分化、凋亡以及應(yīng)激反應(yīng)等生理過(guò)程中的作用機(jī)制。在臨床領(lǐng)域，可輔助疾病的診斷、病情監(jiān)測(cè)及預(yù)后評(píng)估，例如在腫瘤研究中，MAPK 的異常激活與腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)、轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，檢測(cè) MAPK 含量能為腫liu治療方案的制定提供重要參考 。