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動物性食品、水產(chǎn)品中硝基呋喃類藥物殘留檢測方法
硝基呋喃類藥物(Nitrofrans)是一類人工合成的廣譜抗菌藥物，具有很好的抗菌作用和藥動學特性。因其抗菌譜廣、抑菌作用不受膿液和組織分解產(chǎn)物影響、口服吸收迅速、不易產(chǎn)生耐藥性、與其他抗茵藥無交叉耐藥性、價格便宜、使用方便且具有促生長作用，曾經(jīng)廣泛應用于獸醫(yī)臨床預防和治療由大腸桿菌或沙門氏菌引起的腸炎、癤瘡、潰瘍病、赤鰭病等疾病，并且對某些原蟲、真菌有一定的作用。常見的硝基呋喃類藥物有呋喃唑酮(FZD)、呋喃它酮(FTD)、呋喃髑林(NFz)、呋喃妥岡、硝呋索爾(NFs)等。其主要代謝產(chǎn)物分別為3-氨基、惡唑烷酮(AOZ)、5-嗎啉基甲基、3-氨基-2-惡唑烷酮(AMOZ)、1-氨基乙內(nèi)酰胺(AHD)、氨基脲(SEM)、3,5-二硝基水楊酸肼(DNSH)[1-3]。
酶聯(lián)免疫分析法是一種固相免疫測定技術，首先將抗體或抗原包被到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。在測定時，使待檢樣本和酶標抗體或抗原按不同步驟與固相載體表面吸附的抗原或抗體發(fā)生反應，后加入的酶標抗體與免疫復合物結(jié)合，用洗滌的方法分離抗原抗體結(jié)合物和游離的未結(jié)合成分，zui后加入酶反應底物，根據(jù)底物被酶催化產(chǎn)生的顏色及其吸光度(A)值的大小進行定性或者定量分析方法。該方法把抗原抗體反應的特異性和酶的催化作用有機結(jié)合起來，已被，。泛應用于殘留檢測過程中。2001年，Gao Aizhon成功制得用于檢測SEM的特異性單克隆抗體，對SEM的zui低檢測限為0.01ug/L。2004年，Cooper等制備得到了AOZ多克隆抗體，建立了蝦組織中AOZ的酶聯(lián)免疫分析方法(ELISA)，該方法具有靈敏度高、特異性強、價格便宜等特點。隨后，Diblikova、Franek等制備得到了AOZ單克隆抗體，建立了組織中AOZ的ELISA檢測方法，單克隆抗體較多克隆抗體特異性更好，穩(wěn)定性更高，該方法的zui低檢出限可0.3ug/kg。2007年，Cooper等在研究得到SEM的多克隆抗體[4]，利用間接ELISA法對殘留在雞肉中的SEM進行檢測，zui低檢測限為0．25I．tg/kg。2009年，LiJun等應用間接競爭ELISA法對肉雞飼料中的NFT，F(xiàn)TD，NFZ，F(xiàn)ZD進行了檢測，并應用HPLC法進行驗證，方法的檢測限范圍為0.2-2.1ug/g，空白添加回收率范圍為75.9-86.4％。2010年，LiJun等以5-硝基糠醛為分子模板合成了硝基呋喃類藥物的共有半抗原，分別采用重氮法和戊二醛法合成了兩種免疫抗原和兩種包被抗原，zui終建立了一種能夠檢測7種硝基呋喃類藥物的廣譜特異性間接競爭ELISA方法。該法對NFZ、NFX、NFS、FZD、FTD、NFT的zui低檢測限分別為8.3、14.0、15.8、11.0、11.0、13.5ng/g，而且所得結(jié)果與液相色譜法檢測結(jié)果一致。若將該方法應用于實際生產(chǎn)過程中，將會有效的從源頭上遏制動物性食品中硝基呋喃類藥物及其代謝產(chǎn)物的殘留。2011年Jiang Wen xiao研究出法檢測4種動物組織中的AHD的ELISA方法，并采用LC-MS/MS法進行論證，試驗結(jié)果證明兩種方法有很好的相關性，ELISA法具有簡單、快速、準確并且不需要特殊試驗設備等優(yōu)點[5, 6]。目前，國內(nèi)外用于檢測AOZ、AMOZ、SEM和AHD的商品化試劑盒已經(jīng)上市，但未見有針對NTV和NFX及其代謝產(chǎn)物的免疫檢測檢測或產(chǎn)品。
硝基呋喃類藥物殘留檢測儀采用固相酶聯(lián)免疫吸附ELISA的原理,即酶聯(lián)免疫法；藥物殘留快速檢測儀可定量快速檢測阿莫西林、孔雀石綠、磺胺類、黃曲霉毒素(B1，B2，G1，G2 M1 M2 )、疾病診斷、三聚氰胺檢測、恩諾沙星、環(huán)丙沙星、 紅霉素、氯霉素、土霉素、四環(huán)素、 磺胺類(總量)、喹乙醇、已烯雌酚、硝基呋喃類等有毒有害物質(zhì)及抗生素殘留檢測。并且可以連接食品安全監(jiān)控系統(tǒng)。 藥物殘留快速檢測儀廣泛應用于養(yǎng)殖場、屠宰場、肉產(chǎn)品深加工企業(yè)、檢驗檢疫單位使用。
硝基呋喃類藥物殘留檢測儀技術參數(shù)：
☆波長范圍:300nm-1000nm
☆波長準確度:±2nm
☆吸光度范圍: 0.000~4.000ABS
☆分辨率 :0.001Abs
☆穩(wěn)定性 : ±0.001A/hr
☆透射比重復性: ≤0.5%T
☆光源 : 進口LED
☆樣品池 : 微孔板