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合成生物學:細胞間通訊的光遺傳法檢測

時間:2017/5/27閱讀:1664
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合成生物學:細胞間通訊的光遺傳法檢測

基因表達的時間控制對細胞功能和命運起到至關重要的作用,一些基因,如Notch效應子基因Hes1,就表現(xiàn)出了快速的mRNA合成后又基于負反饋信號后而降解的基因表達振蕩模式??茖W家利用光遺傳方法創(chuàng)造出具有快速時空精度的人工振蕩模式,并利用生物發(fā)光或熒光報告基因在單細胞水平進行振蕩探測。然而,科學家目前尚不清楚這種震蕩信息是否可以傳遞給相鄰細胞。
Isomura等(Genes Dev,2017)研發(fā)出一種聯(lián)合光遺傳學和生物發(fā)光的方法來研究這種震蕩信息是否能在細胞間進行傳遞。在光敏的信號發(fā)送細胞里,他們利用由光氧電壓(LOV)結(jié)構(gòu)域蛋白Vivid(VVD)組成的經(jīng)修飾的光激活操控GAVPO系統(tǒng),在藍光照射下,與p65轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域一起組成一個活性同質(zhì)二聚體。該復雜結(jié)構(gòu)通過與上游的激活序列進行結(jié)合,驅(qū)動了Notch效應子配體δ的短暫表達,δ與相鄰光敏細胞上的Notch受體相互作用,該光敏細胞包含了一個不穩(wěn)定的生物發(fā)光Hes1報告基因及其振蕩器回路。對GAVPO表達細胞周期性的藍光照射,基于照射的時長,會在臨近細胞里生產(chǎn)出Hes1震蕩現(xiàn)象。
總體而言,這種光遺傳生物發(fā)光系統(tǒng)能夠以時空分辨率檢測細胞間的通訊。
 

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